Caractérisation des miRNAs de GNAS pour essayer de mieux comprendre la physiopathologie de la pseudohypoparathyroïdie 1B (PHP1B)

La PHP1B est caracterisee par une perte d’empreinte du locus GNAS avec diminution de l’expression de Gsa, proteine cle de la signalisation AMPc. Les symptomes de la PHP1B ne sont pas expliques par le deficit de Gsa. Le transcrit GNAS-AS1 produit 3 miRNAs sur son extremite 3′UTR (hsa-miR-296-5p, hsa-miR-296-3p et hsa-mir-298-5p). Objectifs Demontrer que les GNAS-miRNAs sont soumis a empreinte, caracteriser leur expression et identifier leurs cibles. Methodes Pyrosequencage – qPCR – caracterisation in silico des cibles putatives des miRNAs – surexpression du hsa-miR-296-3p dans des cellules HEK293. Resultats Premierement, les GNAS-miRNAs sont soumis a empreinte (dans des fibroblastes de patient matUPD20, sous-expression du hsa-miR-296-5p et du hsa-miR-296-3p de 400 [ p  = 0,0015] et de 3,5 [ p  = 0,0289] fois) ; deuxiement, les cibles des miRNAs ont ete caracterisees in silico en utilisant miRBase et classes en trois groupes : signalisation de l’AMPc, signalisation du calcium et croissance ; troisiement, dans les cellules HEK, la surexpression du hsa-miR-296-3p reprime significativement l’expression d’AKAP6 et de PRKAG1 de 35 % ( p  = 0,000085) et 44 % ( p  = 0,000023). Dans les leucocytes d’un patient patUPD20, nous avons constate une diminution significative d’AKAP6 ( p  = 0,0015) et une baisse non significative de l’expression de PRKAG1. Ces deux facteurs sont impliques dans la signalisation de l’AMPc ; quatriement, dans les HEK, la surexpression du hsa-miR-296-3p reprime significativement l’expression des 3 transcrits paternels de GNAS (GNAS-A/B, p  = 0,00003 GNAS-AS1, p  = 0,0007 et GNAS-Gsa, p  = 0,0006). Discussion Les miRNAs de GNAS semblent soumis a l’empreinte parentale ; ils pourraient etre impliques dans la physiopathologie de la maladie.