Caveolin-1对OGD/R人脐带血内皮祖细胞中VEGF表达的影响

通过探讨caveolin-1对氧糖剥夺/复氧（oxygen glucose deprivation/reoxygenation,OGD/R）人脐带血内皮祖细胞（endothelial progenitor cells,EPCs）中血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）的影响,为caveolin-1在脑缺血缺氧性疾病中的应用提供实验依据。采用密度梯度离心法获取脐带血单个核细胞,接种在鼠尾I型胶原包被的培养板中,用内皮细胞培养液EGM-2培养,观察EPCs生长情况,通过观察细胞形态、双荧光染色法、免疫荧光细胞化学染色法及流式细胞仪等技术对培养的EPCs进行鉴定。选取EPCs高表达的时间点,构建针对caveolin-1基因的RNA干扰真核表达质粒,建立基因沉默和OGD/R模型,随机分为正常对照组、OGD/R组、caveolin-1基因沉默组、caveolin-1基因沉默OGD/R组。免疫荧光法和Western blot检测caveolin-1及VEGF的表达。人脐带血可分离获得内皮祖细胞;成功构建caveolin-1基因沉默模型;caveolin-1及VEGF的表达在caveolin-1基因沉默组显著低于正常对照组（P〈0.01）;OGD/R组caveolin-1及VEGF表达明显高于正常对照组（P〈0.01）;OGD/R组caveolin-1及VEGF表达明显高于caveolin-1基因沉默OGD/R组（P〈0.01）;caveolin-1基因沉默组caveolin-1和VEGF表达量高于caveolin-1基因沉默OGD/R组（P〈0.05）。以上结果表明,caveolin-1能够影响OGD/R的EPCs中VEGF的表达,是促进血管细胞损伤修复的可能因素之一。