Étude dans le temps de l’activité biologique des différentes L-asparaginases conditionnées en seringues et conservées à +4 °C

Introduction & objectifs La Kidrolase ® est une proteine de la famille des L-asparaginases, enzyme extraite de cultures d’ Escherichia coli , et indiquee dans le traitement des leucemies et du lymphome non hodgkinien. Sa stabilite a +4 °C a ete demontree pour 7 jours en solution isotonique. Des reactions anaphylactiques a cette molecule etant frequemment observees, le traitement de substitution se fait soit par la meme L-asparaginase d’ E. coli , mais dans sa forme pegylee : l’Oncaspar ® , soit par une L-asparaginase extraite de cultures d’ Erwinia chrysanthemi  : l’Erwinase ® . La stabilite de ces molecules une fois diluees est peu etudiee et se limite a 48 h pour l’Oncaspar ® et a 4 h pour l’Erwinase ® . L’objectif de ce travail a ete d’evaluer le maintien dans le temps de l’activite biologique de ces 3 specialites diluees. Methodes Trois niveaux de concentrations, couvrant l’intervalle de posologie ont ete etudies pour chaque molecule : 40, 80 et 160 UI/mL pour la Kidrolase ®  ; 500, 750 et 1000 UI/mL pour l’Erwinase ®  ; 20, 40 et 60 UI/mL pour l’Oncaspar ® . Trois seringues en polypropylene ont ete preparees pour chacune des concentrations de chaque specialite, dans du NaCl 0,9 %. Les 27 seringues ont ete conservees a +4 °C. Des dosages de l’activite biologique ont ete effectues sur l’automate Olympus ® AU 400 par methode enzymatique a 0 h, 6 h, 24 h, 48 h, 5 j et 7 j. La limite d’activite est fixee a 95 % de la valeur initiale. Resultats Apres 7 jours de conservation a +4 °C, la Kidrolase ® reste efficace avec une activite enzymatique a 99,3 ± 5,5 % de l’activite initiale. Pour l’Erwinase ® , l’activite enzymatique est fluctuante d’un dosage a l’autre : l’activite mesuree a 6 h etait de 85,7 ± 10,1 % et celle mesuree a 24 h etait de 93,1 ± 12,0 %. L’activite enzymatique de l’Oncaspar ® reste stable durant toute la periode d’analyse : 97,7 ± 2,5 % de l’activite initiale a j 7. Discussion & conclusions Cette etude nous permet de confirmer le maintien de l’activite de la Kidrolase ® tel qu’il est decrit dans la litterature. De plus, cette etude a permis de demontrer que l’activite enzymatique de l’Oncaspar ® , conserve a +4 °C, est stable 7 jours. Cela signifie que, durant cette periode, la proteine est restee stable chimiquement et que ses conformations ternaires et quaternaires ont ete maintenues. En revanche, cette etude n’est pas concluante pour l’Erwinase ® . L’importante variabilite des resultats signifie que la solution est potentiellement sensible a un stress mecanique ou oxydatif, aux rayonnements ou a un changement de pH.