Resolvendo um caso de ABO discrepante através da genotipagem rápida por PCR-RFLP

O uso das reacoes de hemaglutinacao para identificar discrepâncias ABO pode consumir um grande tempo e dificultar sua interpretacao. Com o conhecimento da base molecular dos antigenos do grupo sanguineo ABO, o PCR-RFLP foi usado para elucidar um caso complexo de discrepância ABO. Materiais e Metodos: Um bebe do sexo feminino com sete meses de idade foi admitido no hospital com o diagnostico de mielofibrose e anemia. Os testes pre-transfusionais usando o gel-teste demonstraram ser a paciente do grupo sanguineo A, com teste de antiglobulina direto e pesquisa de anticorpos negativos. A paciente tinha um resultado previo de tipagem AB. Nos testes de saliva foram detectados as substâncias A e B. Como testes imuno-hematologicos se mostraram inconclusivos, o PCR-RFLP foi feito usando amostras de sangue da paciente e da mae. Apos extracao do DNA genomico, dois fragmentos especificos do gene ABO (exon 6 e 7) foram ampliados usando os primers mo-46/mo-57 e mo-71/mo101 e digeridos com as enzimas Kpn I e Hpa II. Os produtos digeridos foram analisados por eletroforese em gel de agarose. Resultados: Apos o PCR-RFLP na amostra do bebe, foram encontrados os fragmentos 309, 252, 223, 204, 150, 137 e 119 pb, confirmando o genotipo A2B, e na amostra da mae foram encontrados os fragmentos 309, 252, 223, 150 e 137 pb, confirmando, tambem, o genotipo A2B. Conclusao: Nos casos de discrepância ABO, a determinacao do grupo sanguineo ABO pode ser feita pelo PCR-RFLP