Técnica de PCR Simplex associada a método de extração de DNA de baixo custo para identificação molecular de isolados clínicos de Shigella SPP

Shigelose e uma doenca enterica responsavel por 1,1 milhoes de mortes anualmente, 60% destas representadas por criancas menores de 5 anos. Especies de Shigella sao encontradas em agua e alimentos contaminados, sendo a rota de transmissao deste patogeno por meio do contato fecal-oral. O presente estudo visou a adaptar uma tecnica molecular com vistas a identificacao de casos clinicos de gastroenterite provocadas por Shigella spp . A cultura bacteriana do isolado clinico de S. sonnei LCL-01 foi submetida a extracao de DNA genomico por meio do metodo de fenol-cloroformio com modificacoes, submetendo o material genetico resultante a tecnica de PCR simplex . O procedimento de extracao resultou em um DNA genomico de boa qualidade, obtendo-se fragmento de 615 pb apos amplificacao do gene ipa H. Dessa forma, viabilizou-se a identificacao molecular de S. sonnei por meio da adaptacao de uma metodologia in-house de baixo custo, baseada na utilizacao de fenol-cloroformio como ferramenta para romper a parede celular bacteriana visando a extracao de DNA genomico, a qual podera auxiliar no rastreamento, deteccao e tratamento de infeccoes causadas por S. sonnei .