PCR múltiple para la detección simultánea de los genes mecA y pvl en Staphylococcus spp

Este estudio observacional descriptivo de corte transverso tuvo por objetivo estandarizar una PCR multiple para la deteccion simultanea de los genes mecA y pvl en Staphylococcus spp. Se emplearon como cepas control: S. aureus ATCC 25923, S. aureus ATCC 43300 y un aislado de S. aureus portador de los genes mecA y pvl. La extraccion de ADN se realizo por el metodo de ebullicion. El limite de deteccion se establecio por medio de diluciones seriadas de ADN. Se determino la aplicabilidad de la PCR multiple testando 41 aislados de S. aureus y 51 Estafilococos coagulasa negativo (ECN) previamente caracterizados por metodos fenotipicos en noviembre del ano 2009. Los productos de PCR fueron visualizados por electroforesis en gel de agarosa al 2% previa tincion con bromuro de etidio. Los productos de amplificacion de la PCR multiple presentaron tamano esperado de 533pb y 433pb para los genes mecA y pvl respectivamente, con limites de deteccion de hasta 0,5 ng/μL. El gen mecA se detecto en 13 (31,7%) aislados de S. aureus y en 29 (56,7%) ECN. El gen pvl se detecto en 2 (4,9%) S. aureus y no fue detectado en ECN. La presencia del gen mecA tuvo 100% de concordancia con los metodos fenotipicos. Esta tecnica es una herramienta util en la confirmacion de cepas de Estafilococos meticilino resistentes e identificacion del gen pvl, ademas de ser relativamente sencilla con la ventaja de detectar ambos genes en una sola reaccion.