PRODUÇÃO, CARACTERIZAÇÂO E TESTES BIOLÓGICOS COM NANOPARTICULAS DE ÁCIDO LIPÓICO

O acido lipoico (AL) e uma molecula com atividade antioxidante, que age terapeuticamente em diversos disturbios, porem, e quimicamente instavel. Uma alternativa de contorno da instabilidade e incorpora-lo em nanoparticulas de nucleo lipidico (GARCIA; MONSERRAT, 2012, p. 11), tornado o AL associado a nanotecnologia promissores na engenharia de tecidos. O objetivo deste trabalho foi produzir, caracterizar fisico-quimicamente nanoparticulas de nucleo lipidico contendo acido lipoico (AL) e avaliar seu efeito na viabilidade de queratinocitos. As nanoparticulas foram produzidas pelo metodo de deposicao interfacial de polimeros pre-formados (KULKAMP et al ., 2009, p. 2079). O tamanho, potencial zeta e indice de polidispersao (PDI) foram avaliados em um Zetasizer Nano ZS. Para os testes de viabilidade celular, foram semeadas 7.500 celulas HaCat por poco em placas de cultura de 96 pocos e tratadas com nanoparticulas com diferentes concentracoes (0, 25, 50, 75, 100, 250 e 500µM) de AL, ressuspensas em meio de cultura, DMEM. A viabilidade celular foi avaliada pelo ensaio de brometo 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il) -2,4- de difeniltetrazolio (MTT) 2 dias apos o tratamento com as nanoparticulas de AL. Foi analisada a toxicidade das nanocapsulas as celulas, comparando a quantidade de celulas vivas no controle (sem as nanocapsulas) com as contidas nos meios tratados. O tamanho medio das nanoparticulas foi 204,5±3,2nm e PDI, 0,1±0,03, apresentando distribuicao de tamanho controlado e o potencial zeta de -12,3±0,1, caracteristico de nanoparticulas de nucleo lipidico. A media ± desvio-padrao dos valores de absorbância obtidos relacionados a viabilidade celular foram: 0,293±0,014 para 0 de AL; 0,310±0,037 para 25µM (p≥0,05); 0,348±0,023 para 50µM (p≤0,01); 0,374±0,026 para 75µM (p≤0,01); 0,373±0,037 para 100µM (p≤0,01); 0,327±0,044 para 250µM (p≥0,05) e 0,230±0,023 para 500µM (p≤0,01) de AL, mostrando diminuicao da viabilidade apenas na maior concentracao de AL testada. Foram obtidas nanoparticulas de acido lipoico de cerca de 220nm, com densidade de carga negativa, o qual e um parâmetro importante para garantir a estabilidade dos sistemas e melhorar a interacao com membranas biologicas. Essas nanoparticulas induziram o aumento da viabilidade celular de queratinocitos nas doses de 50, 75 e 100µM de AL, sendo, nessas doses, um composto promissor para a medicina regenerativa.