RNA干扰G_(α13)对人卵巢癌HO-8910PM细胞侵袭转移的影响
2017
目的
利用小干扰RNA技术沉默Gα13基因的表达,探讨其对人卵巢癌HO-8910PM细胞生长与转移的影响。
方法
以Shuttle Vector 1.0-CMV为载体,构建针对Gα13的shRNA重组表达质粒;转染人卵巢癌细胞HO-8910PM,利用RT-PCR和Western Blot分别检测Gα13基因mRNA和蛋白的表达水平。体外通过MTT法、Transwell小室、Matrigel胶模型、流式细胞术,观察Gα13被沉默后对人卵巢癌HO-8910PM细胞生长与侵袭转移的影响;放射自显影方法分析Rho GTPases活性。
结果
RT-PCR和Western Blot结果显示,Shuttle Vector 1.0-CMV Gα13 B siRNA转染组Gα13基因的表达水平被有效抑制。与对照组相比,Shuttle Vector 1.0-CMV Gα13 B siRNA转染组的细胞侵袭、迁移力明显下降(P
结论
靶向Gα13的重组shRNA质粒能够有效抑制Gα13基因在HO-8910PM细胞中的表达,并能降低HO-8910PM细胞侵袭迁移的能力,其机制可能与降低细胞膜上Rho GTPases活性有关,可为卵巢癌的靶向治疗提供参考。
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