α-辅肌动蛋白4对卵巢癌细胞增殖、凋亡及化疗敏感性的影响及其机制

目的：探讨体外沉默α-辅肌动蛋白4（alpha-actinin-4，ACTN4）基因的表达对卵巢癌细胞增殖、凋亡及化疗敏感性的影响及其可能的机制。方法：化学合成靶向AcTN4基因的ACTN4-siRNA，体外转染至人卵巢癌细胞株sKOV3和0VCA429中，采用real-timePCR检测ACTN4 mRNA的表达，采用MTT法检测卵巢癌细胞的增殖能力及存活率，采用流式细胞术检测卵巢癌细胞的凋亡情况，采用Western blotting检测凋亡相关蛋白的表达。结果：ACTN4-siRNA转染SKOV3／OVCA429细胞后，ACTN4的mRNA及蛋白的表达均明显下降；细胞增殖能力明显受到抑制。在不同浓度紫杉醇作用下，与转染Ctrl-siRNA的对照组相比，ACTN4-siRNA转染组SKOV3／OVCA429的细胞存活率均显著降低，即转染ACTN4-siRNA后的SK-0V3／0VCA429细胞对紫杉醇的敏感性明显增加（P〈0．01）。SKOV3细胞瞬时转染ACTN4-siRNA48h后，细胞凋亡率[（7．22±0．31）％]明显高于转染Ctrl—siRNA的对照组[（2．07±0．08）％]；OVCA429细胞的情况与之一致，转染ACTN4-siRNAN；细胞凋亡率为[（23．37±0．18）％]，对照组为[（19．49±0．19）％]，差异均有统计学意义（P〈0．05）。转染ACTN4-siRNA后，SKOV3／OVCA429中p-Akt和p-FAK蛋白表达明显减少，抗凋亡蛋白Bcl-2表达明显减少，而促凋亡蛋白Bid和Bim表达则明显增加。结论：AcTN4可以降低卵巢癌细胞的化疗敏感性，这种作用可能通过抑制细胞凋亡实现。