A ultraestrutura dos espermatozoides de algumas espécies da família Leptodactylidae (Amphibia: Anura)

Os anuros da familia Leptodactylidae estao alocados em tres subfamilias: Leiuperinae, Leptodactylinae e Paratelmatobiinae. Com o auxilio da microscopia eletronica, foram observados os espermatozoides de 23 especies de leptodactilideos buscando-se contribuir com elementos para o entendimento de incertezas filogeneticas. Em Pseudopaludicola, genero alocado em Leiuperinae, e comparado o espermatozoide de representantes do grupo P. pusilla e de especies dos quatro clados recuperados na filogenia molecular, os quais correspondem aos grupos cromossomicos 2n=22, 20, 18 e 16. A analise das especies de Pseudopaludicola mostrou que as cabecas dos espermatozoides sao semelhantes e contem a vesicula acrossomal cobrindo o cone subacrossomal. Ja as caudas dos espermatozoides de Pseudopaludicola apresentam diferencas marcantes. Nas especies com numero cromossomico 2n=22, Pseudopaludicola sp. 1 (grupo P. pusilla), P. saltica, P. falcipes e P. mineira, as caudas exibem fibras acessorias (justa-axonemal, membrana ondulante e a fibra axial). Essas fibras tambem sao observadas em P. ternetzi e P. ameghini, ambas do clado com 2n=20, mas nas suas caudas a fibra axial e mais desenvolvida. Nos individuos do clado com numero cromossomico 2n=18, P. canga, P. facureae, P. giarettai, P. atragula e Pseudopaludicola sp. 2 e com 2n=16, P. mystacalis, a cauda apresenta a membrana ondulante espessa, caracterizando um bastao para-axonemal, o qual e mais curto do que a membrana ondulante da cauda dos Pseudopaludicola com numero cromossomico 2n=22 e 20. As diferencas morfologicas ultraestruturais observadas nas caudas dos espermatozoides indicam que esses caracteres podem ser filogeneticamente informativos, quando mapeados na filogenia molecular, pois os perfis ultraestruturais da cauda coincidem parcialmente com a formacao dos quatro clados filogeneticos e possibilitam levantar a hipotese de uma progressiva simplificacao do espermatozoide durante a evolucao do genero Pseudopaludicola. A analise comparativa de especies entre os generos de leiuperineos mostra que as caudas dos espermatozoides de Physalaemus (P. albifrons, P. centralis, P. cicada e P. cuvieri), tambem exibem fibras acessorias, como a fibra justa-axonemal e a membrana ondulante, contudo, a membrana ondulante nesse genero e mais longa que aquela encontrada em Pseudopaludicola. Alem disso, as caudas dos espermatozoides de Physalaemus nao mostram fibra axial. Do genero Engystomops, grupo irmao de Physalaemus, foram analisadas E. petersi, E. freibergi e E. puyango, cujas caudas apresentam fibra justa-axonemal, membrana ondulante e fibra axial. Esses generos diferem ainda pela membrana ondulante mais curta em Engystomops, corroborando a revalidacao do genero Engystomops. A cauda de Engystomops puyango difere de E. petersi e E. freibergi, clado Duovox, e e igual a E. pustulosus, do clado Edentulus, indicando a necessidade de ampliar os estudos desse genero. A especie Pleurodema diplolister, do genero proximo a Physalaemus e Engystomops, apresenta na cauda do espermatozoide a fibra justa-axonemal e a membrana ondulante, as quais sao semelhantes aquelas observadas nas especies de Physalaemus, entretanto, a membrana ondulante de P. diplolister e menor que a observada em Physalaemus. A comparacao dos espermatozoides de representantes das outras subfamilias de Leptodactylidae mostrou que Paratelmatobiinae, representada por P. poecilogaster, apresenta estruturas iguais aquelas observadas nos Pseudopaludicola do clado com numero cromossomico 2n=22. Por outro lado, a especie analisada, Leptodactylus natalensis, Leptodactylinae, apresenta fibra axial bem desenvolvida, diferente daquela exibida nos espermatozoides de Engystomops, Pseudopaludicola e P. poecilogaster. A outra especie de Leptoctylinae, Adenomera marmorata, a qual era alocada em Leptodactylus, apresenta apenas o axonema na cauda do espermatozoide. Essa diferenca ultraestrutural das caudas de A. marmorata e L. natalensis, corrobora com a re-alocacao de A. marmorata como especie valida e diferente de Leptodactylus. A descricao ultraestrutural dos gametas masculinos leptodactilideos mostra caracteres filogeneticos informativos, principalmente aqueles das caudas dessas celulas, que podem ser usados para o entendimento dos relacionamentos intragenerico e intergenerico. Abstract