ANTIBODIES USED FOR AN IMMUNOLOGICAL CROSS-REACTIVITY BETWEEN POLAR TUBE PROTEINS OF ENCEPHALITOZOON CUNICULI (MICROSPORIDIA) AND PROTEINS POLAR FILAMENT OF MYXOBOLUS EPISQUAMALIS (MYXOZOA) PARASITE OF FLATHEAD MULLET MUGIL CEPHALUS (MUGILIDAE).

Myxobolus episquamalis ( Egusa, Maeno and Sorimachi, 1990) , a myxosporean parasite, was found for the first time infecting scales with white cysts and fins of flathead mullet (Mugil cephalus) which is a common habitant of tropical and subtropical coastal waters and an important food fish species. Myxozoa are characterized by the presence of polar capsules each containing a coiled polar filament that serves after extrusion to anchor the parasite to the host tissue. This eversible polar filament also resembles the polar tube of Microsporidia, a large phylum of obligate intracellular eukaryotes that are fungal-related parasites. In the present study, we tested the ability of antibodies raised against microsporidian polar tube proteins (PTPs) to cross-react with antigens of M. episquamalis . Immunofluorescence assays (IFA) using antibodies directed against PTPs of the mammal microsporidian Encephalitozoon cuniculi (Ec102, anti-PTP1/PTP2 and Ec1b,anti-PTP3) showed a strong fluorescence signal associated with extruded polar filaments of M. episquamalis spores. In Western blot, these antibodies cross-reacted with antigens of ~50/55 kDa (Ec102) and ~150 kDa (Ec1b) in size, suggesting the existence of common epitopes between microsporidian PTPs and M. episquamalis polar filament antigens. Specific mouse polyclonal antibodies were then produced against M. episquamalis antigens corresponding to two SDS-PAGE separated protein bands recognized by the antisera Ec102. As expected, these antibodies specifically stained polar filaments in IFA and by immunogold labelling in transmission electron microscopy (TEM). Keywords: Myxobolus episquamalis, Mugil cephalus, polar filament, immunofluorescence assays, immunogold labelling, microsporidia, myxozoa. Encephalitozoon cuniculi (Microsporidie) et les proteines du filament polaire de Myxobolus episquamalis (Myxozoa) parasite du mulet Mugil cephalus (Mugilidae) . Myxobolus episquamalis (Egusa, Maeno et Sorimachi, 1990), appartient au phylum des Myxozoa. Cette myxosporidie a ete identifiee pour la premiere fois au Japon parasitant les ecailles de Mugil cephalus qui appartient a la famille des Mugilidae. Les Myxosporidies et les Microsporidies ont pendant longtemps, ete regroupes avec les Actinomyxidies dans le sous embranchement des Cnidospora Dolfein, 1901 avant d’etre separes en deux embranchements differents grâce aux travaux de Grasse (1960). Elles sont toutes les deux caracterisees par la presence d’un systeme d’ancrage comprenant un tube polaire chez les Microspora et un filament polaire enroule en spirale a l’interieur des capsules polaires chez les Myxozoa. Bien que le filament polaire de Myxozoa ne joue pas le meme role que le tube polaire des Microspora, une homologie structurale de leurs proteines pourrait etre envisagee. C’est dans cette optique que nous avons essaye de mettre en evidence des  proteines homologues entre le tube polaire des Microspora et le filament polaire des Myxozoa en utilisant des anticorps heterologues PTP1, 2 ou 3 (Proteine du Tube Polaire) de Encephalitozoon cuniculi , contre des antigenes de Myxobolus episquamalis . Pour cela, nous avons procede a des marquages en Immunofluorescence, en Western blot et en Microscope electronique a transmission (MET). Des anticorps polyclonaux anti- M.episquamalis ont ete produits chez la souris et testes de la meme facon. Les resultats montrent qu’en immunofluorescence, en utilisant des anticorps diriges contre les PTP de Encephalitozoon cuniculi (EC102, anti-PTP1 / PTP2 et EC1b, anti-PTP3), un fort signal fluorescent associe au filament polaire de M. episquamalis visible sur toute sa longueur en microscopie optique au grossissement X 400 a ete note. Ceci  traduit une bonne reaction croisee entre les proteines du filament polaire et ces anticorps. Les immunomarquagesrealises en Western blot, montrent que ces anticorps utilises contre les antigenes de M. episquamalis, marquent des proteines de ~ 50/55 kDa (EC102) et ~ 150 kDa (EC1b) ce qui suggere l'existence d'epitopes communs entre les proteines du tube polaire        (PTP) de E. cuniculi et des proteines du filament polaire de M. episquamalis .  En microscopie electronique a transmission, la presence des particules denses au niveau des parois internes des capsules polaires ainsi qu’autour des coupes du filament polaire traduisent des reactions croisees entre les proteines de ces deux structures. Mots cles: Myxobolus episquamalis, Mugil cephalus, filament polaire, tube polaire, immunofluorescence, immunomarquage, microsporidie, myxozoa.