Snail 在AP-1介导的肾小管上皮细胞转分化中的作用

目的：探讨Snail 在AP-1介导的肾小管上皮细胞转分化中的作用及对细胞外基质分泌的影响. 方法：将体外培养的人肾小管上皮细胞（HK2）分为正常对照组、高糖组、AP-1阻断组.细胞免疫化学法检测E-钙黏蛋白（E-cadherin）和波形蛋白（vimentin）的表达,ELISA法测定培养液上清中纤连蛋白（FN）的浓度变化,用凝胶电泳迁移率改变分析法（EMSA）检测HK2细胞AP-1的改变,RT-PCR法检测vimentin mRNA和Snail mRNA的表达,Western blotting检测E-cadherin的表达.结果：高糖作用HK2细胞48h后,高糖组FN浓度较正常对照组显著增加（P〈0.05）,而AP-1阻断组浓度显著低于高糖组（P〈0.05） 高糖能够刺激AP-1结合活性,AP-1阻断剂可显著抑制AP-1的活化 高糖组Snail mRNA表达水平较正常对照组显著增加（P〈0.05）,而AP-1阻断组其水平显著低于高糖组（P〈0.05） 与正常对照组相比,高糖组E-cadherin蛋白表达明显降低（P〈0.05）,而AP-1阻断组其水平显著高于高糖组（P〈0.05） 高糖组vimentin mRNA和蛋白水平明显高于正常对照组（P〈0.05）,而AP-1阻断组显著低于高糖组（P〈0.05）.结论：高糖可导致肾小管上皮细胞AP-1活化,诱导Snail表达而下调E-cadherin,同时导致vimentin蛋白的表达、细胞外基质FN的分泌增加,诱导其表型转化,参与糖尿病肾病的纤维化进程.