UTILIZAÇÃO DA MEMBRANA CORIOALANTÓICA (CAM) PARA AVALIAÇÃO HISTOLÓGICA DO COMPOSTO MESOIÔNICO MI-D SOB AÇÃO DE NEUROBLASTOMA

Introducao: Compostos mesoionicos, sao substâncias lipofilicas que possuem uma distribuicao desigual de eletrons, lhes permitindo ter atividade biologica. Nesse trabalho foi estudada a citotoxicidade e efeito antiangiogenico do composto mesoionico MI-D (cloreto de 4-fenil-5-[4-nitrocinamoil]-1,3,4- tiadiazolio-2-fenilamina), sobre celulas de neuroblastoma (SH-SY5Y). Para os experimentos envolvendo a angiogenese foi utilizada a membrana corioalantoica (CAM) de embriao de galinha, um tecido extra embrionario, altamente vascularizado que apresenta respostas semelhantes a mamiferos. Objetivos: Avaliar histologicamente os resultados do uso do MI-D sobre celulas de neuroblastoma (NB) enxertadas na CAM. Material e metodos: Para os testes de citotoxicidade in vitro, foram cultivadas celulas de neuroblastoma em meio DMEM, essas foram expostas a diferentes concentracoes da droga (1,6; 3,12; 6,25; 12,5; 25 e 50 µM), por 24 horas, apos isso foi avaliada a perda de viabilidade celular. Os experimentos in vivo foram realizados no 9o dia embrionario dos ovos, foi feita uma abertura na casca para a expor a CAM e nela colocados implantes contendo celulas tumorais acompanhadas de diferentes concentracoes de MI-D (12,5, 25 e 50 µM) e retornadas a incubacao. 3 dias depois, as janelas foram reabertas para documentacao fotografica da CAM e contagem de vasos. Uma amostra da membrana foi removida para o estudo histologico e o embriao foi eutanasiado. Resultados: A droga in vitro, provocou uma grande reducao na viabilidade celular (cerca de 60-80%). Nos testes in vivo observou-se a fixacao das celulas do NB na membrana. Porem, nao foi possivel observar o efeito antiangiogenico do composto, pois que ele foi letal aos embrioes. Conclusao: Observou-se que o MI-D apresentou capacidade citotoxica in vitro, ocasionando grande perda na viabilidade celular. Os experimentos envolvendo a CAM, mostraram, nas analises preliminares, que as celulas de NB conseguiram se fixar na membrana. Mas nas condicoes desse protocolo, o MI-D foi letal aos embrioes.