羊传染性脓疱病毒趋化因子结合蛋白(CBP)基因的克隆及表达分析

2011 
参照GenBank中ORFV的毒力因子CBP基因的核苷酸序列设计合成1对特异性引物,采用PCR方法扩增该基因片段,并克隆入原核表达载体pGEX-4T-1中,经PCR、酶切鉴定和测序正确后,转入E.coli BL21(DE3)感受态细胞中,经IPTG进行诱导表达,并通过生物信息学软件进行分析。SDS-PAGE结果可见大小约为49 000的融合蛋白条带,抗原性分析表明其具有良好的免疫原性;此外,Western-blotting试验结果确证了GST-CBP融合蛋白的表达并证实其具有良好的免疫原性。结果表明,本研究成功诱导表达GST-CBP融合蛋白,这将为进一步研究CBP的功能及理化特性,以及开发以CBP为基础的诊断抗原奠定了物质基础。
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