Développement et évaluation des performances de multicapteurs à ADN électrochimiques mono- et bi-enzymatiques : application à la détection de génome viral

La realisation et la caracterisation d’un multicapteur electrochimique a base de carbone constitue de huit electrodes associe a un lecteur dedie sont d’abord decrites. Ces electrodes sont recouvertes d’une monocouche d’avidine qui est caracterisee par le biais de la fixation de biotines marquees a la peroxydase de raifort (HRP) et grâce a une relation etablie entre la concentration surfacique en enzyme et la valeur du courant electrocatalytique mesuree en presence de peroxyde d’hydrogene et d’un complexe d’osmium. Puis, ce biocapteur « avidine » est utilise dans le cadre de dosages par hybridation impliquant la HRP et sa detection electrocatalytique. Des limites de detection de 200 pM et 30 pM ont respectivement ete calculees pour une cible oligonucleotidique et un fragment amplifie d’ADN du cytomegalovirus humain. Enfin, l’usage d’un systeme bi-enzymatique associant la phosphatase alcaline et la diaphorase a permis d’ameliorer la sensibilite du dosage du fragment amplifie pour atteindre un seuil de detection de 6000 copies de cible par cellule electrochimique (10-15M).