Detection of the expression of β-3-integrin on hantavirus permissive cells

目的克隆表达β3-整合素基因,制备抗体,并用之进行β3-整合素表达阴性Vero细胞的分离和富集.方法采用RT-PCR扩增克隆β3-整合素基因,亚克隆至pQE30表达质粒,在原核细胞中表达,免疫印迹实验确证其表达及免疫反应性.纯化蛋白免疫接种家兔制备抗体,补体介导的抗体依赖性的细胞毒实验分离富集目的细胞,免疫荧光及免疫印迹检测筛选结果.结果成功克隆β3-整合素基因,并在pQE30表达系统中得到高效表达.免疫印迹证实所表达的β3-整合素蛋白具有良好的免疫反应性.制备了高效抗体,免疫荧光及免疫印迹均未检测出β3-整合素在Vero、VeroE6、Hep-2,2BS和293等汉坦病毒敏感细胞表面的表达.结论除β3-整合素外,汉坦病毒很可能还有别的受体.