环介导等温扩增（LAMP）试剂盒检测石蜡包埋肝组织中乙型肝炎病毒（HBV）共价闭合环状DNA（cccDNA）

目的 建立一种检测石蜡包埋的肝组织中乙型肝炎病毒（hepatitis B virus,HBV）共价闭合环状DNA（covalently closed circular DNA,cccDNA）的新方法,并探讨其应用价值和临床意义。方法提取30例慢性HBV感染患者的石蜡包埋肝组织中的DNA,采用质粒安全ATP依赖性DNA酶（plasmid-safe ATP-dependent DNase,PSAD）消化,去除非cccDNA后,加入引物及Bst DNA酶进行环介导等温扩增（loop-mediated isothermal amplification,LAMP）,将检测结果与临床实验室资料结合并进行分析,以判断其临床应用价值。结果 30例HBV感染患者中,有17例HBV cccDNA阳性,阳性检测率56.67%。其中肝癌5例、肝硬化4例、重型乙型肝炎5例、慢性乙型肝炎（轻-中度）3例。提示肝组织HBV cccDNA阳性可能与疾病进展密切相关,与血清HBV cccDNA阳性有一定的相关性,与乙型肝炎病毒血清免疫标志物以及肝功能状况无明显相关。结论 LAMP法能检测到石蜡包埋肝组织中的HBV cccDNA,结合临床实验室资料,对判断抗病毒药物疗效及研究乙型肝炎致病机制具有一定的意义。