干扰 MSTN 对绵羊成肌细胞增殖分化及相关基因表达的影响

旨在探讨 MSTN 基因对绵羊成肌细胞增殖和分化的作用及相关机制，进一步揭示 MSTN 在绵羊成肌细胞中的生物学功能。本研究利用重组腺病毒介导shRNA干扰绵羊成肌细胞内源性 MSTN 基因表达，通过CCK-8法检测成肌细胞增殖能力，流式细胞仪检测细胞周期变化，qRT-PCR检测 p 21基因表达。成肌细胞诱导分化后利用免疫细胞化学技术检测肌管的形成情况，统计细胞融合率，qRT-PCR检测诱导48、72、96 h后 MyoD 、 MyoG 、 Myf 5、 Myf 6和 HACD 1基因的表达量变化。结果发现，干扰 MSTN 后成肌细胞的增殖受到抑制，细胞周期停滞在G0/G1期，并且 p 21的表达呈上升趋势。在对成肌细胞分化作用的研究中，发现干扰组与阴性对照组相比，诱导48 h 4个生肌调节因子的表达量均呈下降趋势， MyoG 基因表达显著下调（ P P Myf 5和 Myf 6基因表达量极显著降低（ P MyoD 基因表达量升高不显著（ P >0.05）， MyoG 基因表达量极显著增加（ P Myf 5基因表达量显著降低（ P MyoD 基因表达量降低不显著（ P >0.05）， MyoG 基因表达量极显著降低（ P Myf 6基因表达量升高不显著（ P >0.05）。另外诱导72 h， HACD 1基因的表达量在干扰组中显著高于阴性对照组（ P MSTN 表达对成肌细胞的增殖有抑制作用，对分化有促进作用， HACD 1基因与成肌细胞融合相关。