pcDNA3．1（＋）／ATP7B对TX小鼠成纤维细胞铜代谢的影响

[目的]研究Wilson病野生型基因ATP7B cDNA真核表达载体pcDNA3.1(+)/ATP7B对TX小鼠成纤维细胞铜代谢的影响.[方法]构建人Wilson病野生型基因ATP7B cDNA的真核表达载体pcDNA3.1(+)/ATP7B.随机选取TX小鼠20只构建TX小鼠的成纤维细胞模型,平行分成3组,一组未加质粒,另两组分别加入等量pcDNA3.1(+)和pcDNA3.1(+)/ATP7B,观察对细胞模型铜代谢的影响.并进行免疫组化实验以观察表达是否增强.[结果]实验前未加质粒组,加入pcDNA3.1(+)组与加入pcDNA3.1(+)/ATP7B组细胞内铜含量分别为(78±20),(77±17),(75±13)ng/mg;实验后分别为(76±20),(74±13),(40±10)ng/mg.与未加质粒组和加入pcDNA3.1(+)相比,加入pcDNA3.1(+)/ATP7B组的细胞内铜含量显著下降(P皆＜0.01),其细胞内ATP7B蛋白的表达明显增强.[结论]Wilson病真核表达载体pcDNA3.1(+)/ATP7B在TX小鼠成纤维细胞水平上确有排铜作用.