Transport of albumin into the intestinal lumen of the rat

L'intestin est un site important de degradation et de clairance des proteines seriques. Le mecanisme de transport des macromolecules de la sereuse vers la lumiere n'est pas clair. La presente etude a eu pour but de caracteriser le transport sereuse-muqueuse de l'albumine. Le transport de serum-albumine bovine (SAB) a ete evalue dans des chambres de Ussing, en utilisant le jejunum pele de rat, depourvu de plaques de Peyer. Pour definir la cinetique du transport d'albumine de la sereuse vers la muqueuse, la surface de la sereuse a ete exposee a diverses concentrations de SAB (0,5-5 mg.mL -1 ). Les liquides provenant du compartiment muqueux ont ete echantillonnes sur une certaine periode et analyses par ELISA pour determiner la SAB immunologiquement intacte. Toutes les experiences subsequentes ont ete effectuees en utilisant la concentration de SAB froide (2 mg.mL -1 ), qui a produit des taux maximums de transport de SAB intacte. Pour evaluer le transport de SAB totale (SAB intacte plus SAB degradee), 10 μCi (1 Ci = 37 GBq) SAB marquee a 125 I ont ete ajoutes au 2 mg.mL -1 de SAB au niveau de la surface sereuse. Pour caracteriser davantage le transport de SAB, les tissus ont ete traites avec du fluorure de sodium (NaF) (un inhibiteur metabolique) ou de la colchicine (un inhibiteur de la polymerisation des microtubules), ou avec le bloqueur nerveux tetrodotoxine (TTX). Toutes les experiences utilisant les inhibiteurs ont ete faites dans des paires d'echantillons de tissus provenant d'un meme animal. Le transport de SAB intacte dans la lumiere intestinale s'est revele saturable, avec une V max de 251 ± 13 ng.cm -2 .h -1 et une K m de 0,72 ± 0,1 mg.mL -1 , et a represente 7% du flux de SAB totale dans la lumiere intestinale. En presence de NaF (2 x 10 -3 M), le transport de SAB intacte et totale a ete significativement inhibe (intacte: temoin 374 ± 80 vs. NaF 46 ± 11, inhibition de 88%; totale: temoin 3288 ± 296 vs. NaF 2550 ± 235 ng.cm -2 .h -1 , une inhibition de 22%; p < 0,05). De plus, la colchicine a significativement inhibe le transport de SAB intacte (temoin 339 ± 15 vs. colchicine 206 ± 13 ng.cm -2 .h -1 , inhibition de 39%; p < 0,05). La TTX n'a eu aucun effet sur le flux de SAB totale. Les resultats suggerent que le transport de SAB intacte de la sereuse vers la lumiere intestinale est lie a un processus de saturation energie dependant, qui implique les microtubules mais qui n'est pas soumis a une regulation neurale.