苯并（a）芘对大鼠肺组织内CYP1A2和CYP2E1基因表达的影响

目的观察苯并（a）芘（Benzo（a）pyrene,B[a]P）对SD大鼠肺组织内细胞色素P4501A2（cytochromeP4501A2,CYP1A2）和细胞色素P4502E1（cytochromeP4502E1,CYP2E1）基因表达的影响.方法（1）动物及给药方法：40只健康SD大鼠,♀♂各半,清洁级,200～250g,随机分为B[a]P25mg·kg^-1、B[a]P50mg·kg^-1和B[a]P100mg·kg^-1染毒组和空白对照组,每组10只.各染毒组B[a]P溶于橄榄油成均匀的混悬液,空白对照组给等体积的橄榄油,每日1次,连续灌胃14d（染毒各组在d14一次性腹腔注射各个剂量的B[a]P后）,禁食不禁水24h后断头放尽血液,剖胸迅速取出肺组织放入液氮中速冻,后迅速转移至-80℃冰箱保存备用（用于总RNA提取和基因表达分析）.（2）大鼠肺组织RNA的提取：参照RNA提取试剂盒说明书方法提取大鼠肺总RNA,测定RNA溶液的吸光度（A260）和A260/A280以判断总RNA的浓度和纯度,甲醛变性琼脂糖凝胶电泳以判断RNA的完整性.（3）逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）：用RT-PCR反应试剂盒检测CYP1A2和CYP2E1基因mRNA的表达,以β-actin作为内对照,分析B[a]P对大鼠肺组织中CYP1A2和CYP2E1基因mRNA表达的影响.结果与空白对照组相比,高、中剂量的B[a]P组可显著影响肺组织内CYP1A2和CYP2E1基因的表达,差异具有统计学意义（P〈0.05）,而低剂量的B[a]P组与空白对照组比较差异无显著性（P〉0.05）.结论一定剂量的B[a]P可显著影响肺组织内CYP1A2和CYP2E1基因的表达,提示CYP1A2和CYP2E1基因可能参与B[a]P的代谢过程,催化B[a]P生成有毒的代谢产物,本研究对B[a]P相关的代谢酶的影响及B[a]P致癌机制的探讨具有-定的理论意义,为进一步探索B[a]P的致癌机理及与代谢酶相关基因的相互作用奠定一定的研究基础.