m 6 A去甲基化酶ALKBH5抑制胃癌细胞运动侵袭和Wnt信号通路活性的机制

目的研究RNA去甲基化酶ALKBH5对胃癌细胞迁移和侵袭能力的影响及机制。 方法利用人类癌症基因库(the cancer genome Atlas, TCGA)对ALKBH5差异表达的胃癌患者进行总生存期分析；应用小鼠胃原位种植和转移模型分析ALKBH5的蛋白表达与胃癌细胞转移的相关性；通过构建敲低/过表达细胞株，结合Transwell实验研究ALKBH5对胃癌细胞迁移和侵袭能力的影响；利用m6A修饰位点预测网站m6AVAR( http://m6Avar.renlab.org/index.html )，结合蛋白免疫印迹、放线菌素D处理结合实时荧光定量PCR，检测Wnt信号通路下游基因表达和mRNA稳定性。 结果TCGA数据库提示ALKBH5的低表达提示胃癌患者更短的生存期；体内实验验证ALKBH5的低表达与胃癌细胞远处转移相关；ALKBH5的敲低可以促进胃癌细胞的侵袭和转移；Wnt下游分子MYC，CD44，c-Met的mRNA上存在m6A修饰位点；ALKBH5缺失时，Wnt下游分子的蛋白表达增加及mRNA稳定性增强。 结论ALKBH5表达缺失促进胃癌细胞迁移和侵袭能力，维持Wnt信号通路的激活。