Spécificité épitopique de la réponse immunitaire humorale non-neutralisante et neutralisante chez l'hémophile A

L'hemophilie A (HA) est une maladie hemorragique hereditaire due au deficit en facteur FVIII (FVIII) de la coagulation. Le traitement preventif de l'HA est base sur des injections repetees de FVIII. Une reponse immunitaire anti-FVIII peut se developper secondairement au traitement, mettant en jeu des anticorps (Ac) inhibiteurs (neutralisant l'activite procoagulante du FVIII) et/ou des anticorps non-neutralisants (ANN). La cartographie epitopique fine des Ac anti-FVIII permet de mieux connaitre les mecanismes physiopathologiques de cette reponse immunitaire. Les travaux de cette these comportent deux axes principaux : un premier axe a pour objectif d'identifier des epitopes discontinus au sein des domaines C2 et A2 du FVIII, a l'aide de peptides synthetiques predits par un algorithme informatique, utilises ensuite dans des tests d'inhibition bases sur la technologie Luminex. Ces travaux nous ont permis d'identifier 8 peptides mimant des epitopes discontinus repartis a la surface du domaine C2 et 2 peptides correspondant a des epitopes voisins, a la surface du domaine A2. Ces etudes ont permis de demontrer que la combinaison de la bioinformatique et d'un outil experimental adapte a la reponse immunitaire anti-FVIII est fructueuse. Le second axe a pour objectif d'etudier la prevalence et la specificite epitopique des ANN a l'aide d'un test Luminex multiplexe. Cette etude a permis de mettre en evidence une prevalence d'ANN de 18,1% chez 210 hemophiles A sans inhibiteurs provenant d'une cohorte multicentrique retrospective francaise. Une forte specificite epitopique de la reponse immune pour la chaine lourde du FVIII est observee. Les nouveaux outils que nous avons mis en place permettront d'affiner la cartographie epitopique et le suivi de son evolution chez l'hemophile A avec anticorps anti-FVIII