重组质粒pIRES—GM—CSF—IL-21的构建及其治疗小鼠肝癌移植瘤的疗效

目的构建重组质粒plRES—GM—CSF—IL-21，观察其在小鼠体内的抑瘤作用。方法将体外培养的肝癌H22细胞接种于小鼠肝左叶，成瘤后，将小鼠分为5组，每组10只，分别尾静脉注射重组质粒plRES—GM—CSF—IL-21、plRES-GM—CSF、plRES—IL-21、plRES和PBS，观察各组荷瘤小鼠的肿瘤生长情况以及GM—CSF和IL-21的抗肿瘤效应。采用酶联免疫吸附法检测小鼠血清γ干扰素（IFN-γ）和白细胞介素2（IL-2）的含量。采用四甲基偶氮唑蓝法检测小鼠脾脏自然杀伤细胞（NK）和细胞毒T淋巴细胞（CTL）的活性。结果H22组、H22／Neo组、H22／GM—CSF组、H22／IL-21组和H22／GM-CSF—IL-21组小鼠的肿瘤重量分别为（1．591±0．280）g、（1．489±0．155）g、（0．603±0．223）g、（0．583±0．290）g和（0．303±0．323）g，H22／GM—CSF—IL-21组、H22／IL-21组和H22／GM-CSF组小鼠的肿瘤重量明显低于H22组和H22／Neo组（P〈0．01），H22／GM—CSF—IL-21组小鼠的肿瘤重量明显低于H22／GM—CSF组和H22／IL-21组（P〈0．05）。与H22／GM—CSF组和H22／IL-21组比较，H22／GM—CSF-IL-21组小鼠血清中IFN-γ和IL-2的浓度显著升高（P〈0．01），而H22组和H22／Neo组小鼠血清中IFN-γ和IL-2的浓度显著降低（P〈0．01）。与H22／GM—CSF组和H22／IL-21组比较，H22／GM-CSF—IL-21组小鼠脾脏CTL和NK细胞的杀伤活性显著增强（P〈0．01），而H22组和H22／Neo组小鼠脾脏CTL和NK细胞的杀伤活性显著降低（P〈0．01）。结论重组质粒pIRES-GM—CSF-IL-21对小鼠肝癌移植瘤具有明显的抗肿瘤效应，并能促进小鼠体内IFN-γ和IL-2的分泌，增强脾脏中NK和CTL细胞的活性，其效果优于单一GM—CSF或IL-21基因治疗。