miR-223在CXCR4^＋ Lewis肺癌细胞中的显著低表达及其靶基因预测

目的分析miR-146a、miR-206、miR-223、let-7c-1等细胞分化相关miRNAs,在小鼠Lewis肺癌细胞株（theLewis lung cancer cell lines,LLC）CXCR4＋与CXCR4-亚群间的差异表达。方法免疫磁珠分选CXCR4＋和CXCR4-LLC细胞,Trizol法抽提细胞总RNA,实时荧光定量PCR（TaqMan探针）检测miRNAs表达,对表达差异最为显著的miRNAs进行潜在靶基因预测,应用免疫组化方法初步分析具有研究价值的关键分子在两个不同亚群小鼠种植瘤组织中的表达情况,并通过BLAST对其3′非翻译端（untranslated region,UTR）进行直向同源基因序列比对分析。结果CXCR4＋与CXCR4-LLC比较,各检测mirna表达均较低,其中以miR-223差异最为显著（Fold Change=8.26）,通过软件分析预测,miR-223与IGF1R、IGFBP5、Pik3cb、ELK-1和E2F1等基因均具有可能靶位点,免疫组化检测发现CXCR4＋亚群种植瘤组织IGF1R表达显著高于CXCR4-亚群,IGF1R3′UTR的238～244nt 和688～695nt两个结合位点具有高度的进化保守性。结论miR-223在CXCR4^＋ LLC中显著低表达，可能与肺腺癌细胞IGFIR信号通路调控有关。