ID-LC-MS/MS方法对高糖血症SD大鼠肾组织DNA中8-oxo-dGsn的检测

目的 用同位素稀释高效液相-串联质谱法（Isotope-Diluted LC-MS/MS,ID-LC-MS/MS）和免疫组化法检测高糖血症SD大鼠肾组织DNA氧化产物8-羟基脱氧鸟苷（8-oxo-dGsn）的含量,评价高糖血症对大鼠肾组织DNA氧化损伤的影响.方法 健康雄性SD（Sprague-Dawley rats）大鼠28只,随机分为4组：3月糖尿病模型组（3DR组）及其对照组（3CR组）,6月糖尿病模型组（6DR组）及其对照组（6CR组）.糖尿病模型组接受腹腔单次链脲佐菌素（streptozotosin,STZ）每公斤70mg注射,对照组接受腹腔生理盐水注射.糖尿病模型组造模成功3个月及6个月后,分别抽提大鼠肾组织DNA,用ID-LC-MS/MS方法检测其DNA氧化产物8-oxo-dGsn的含量;用免疫组化法观察肾组织中DNA氧化损伤部位及程度.结果 糖尿病模型组造模成功3个月时肾组织DNA中8-oxo-dGsn高于对照组高,造模成功6个月时肾组织DNA中8-oxodGsn含量比正常对照组增加显著（P＜0.01）;免疫组化结果显示3个月模型组DNA氧化损伤水平高于对照组,6个月时模型组DNA氧化损伤更为严重.结论 高糖血症3个月可造成大鼠肾组织DNA的氧化损伤,高糖血症6个月时大鼠肾组织中DNA氧化损伤程度呈显著增加,高糖血症是肾组织中DNA氧化损伤的重要原因.