Caracterização fenotípica e genotípica de staphylococcus aureus isolados de queijo minas frescal industrial e artesanal

S. aureus e um importante patogeno de origem alimentar com capacidade de producao de toxinas extracelulares e resistencia antimicrobiana. Entre os alimentos envolvidos em intoxicacao alimentar estafilococica, destaca-se o queijo, principalmente quando fabricado em condicoes higienicossanitarias improprias. Os objetivos deste estudo foram caracterizar S. aureus isolados de queijo Minas frescal artesanal e industrializado, determinar o perfil de suscetibilidade a antimicrobianos, bem como determinar a similaridade genetica entre os isolados. Os isolados foram tambem testados para genes de enterotoxinas estafilococicas (SE) e outros fatores de virulencia. Foram analisadas 56 amostras de queijo Minas frescal de fabricacao artesanal e dez de fabricacao industrial comercializados em feiras livres e supermercados de Goiânia-GO, coletadas entre junho e agosto de 2014. S. aureus foi confirmado em 19 amostras (33,9) de queijo artesanal atraves da deteccao do gene femA, onde 29 isolados foram obtidos. Estes isolados foram submetidos ao teste de susceptibilidade aos antimicrobianos e classificados em nove diferentes perfis (A - I). Treze isolados (44,8%) foram resistentes a penicilina e tres (10,3%) a tetracilina, sendo dois (7,4%) resistentes a ambos. A tecnica de multiplex PCR foi realizada para a deteccao de genes de virulencia que codificam a producao de hemolisinas (Hla e Hlb), TSST-1, toxinas esfoliativas (ETa e ETb) e enterotoxinas (EEA - EEE, EEG - EEJ, EEM - EEO). Genes que codificam as toxinas TSST-1 e esfoliativa nao foram detectados. Todos os isolados amplificaram para o gene hla e 14 (48,3%) para o gene hlb. O gene seh foi o mais frequentemente detectado (n=11; 37,9%), seguido do gene seo (n=3; 10,3%), genes seg, sem, sen (n=2; 6,9%) e os genes sec e sei (n=1; 3,4%). Um isolado (3,4%) amplificou genes para quatro enterotoxinas e outro (3,4%) para seis. A comparacao dos 29 isolados de S. aureus feita por PFGE revelou 18 padroes de bandas diferentes de DNA agrupados em cinco clusters. A genotipagem demonstrou alta similaridade genetica entre os isolados. Isolados identicos foram obtidos de amostras diferentes e uma mesma amostra apresentou mais de um isolado geneticamente diferente. Identificou-se ate quatro diferentes isolados da mesma amostra. A alta prevalencia de S. aureus nas amostras de queijo Minas Frescal, bem como a deteccao de genes para producao de toxinas, alertam para a necessidade de reduzir os niveis de contaminacao neste tipo de queijo atraves de monitoramento e controle da producao e comercio do produto.