Avaliação da expressão dos receptores de interleucina-8, CXCR1 e CXCR2, e da atividade proliferativa em fibroblastos de quelóide e de pele normal

O queloide e um tumor fibroso benigno que ocorre durante a cicatrizacao da pele em individuos geneticamente predispostos. A cicatrizacao e um processo biologico complexo e depende da interacao de diferentes estruturas teciduais e de um grande numero de tipos celulares residentes e infiltrativos, que produzem citocinas. A interleucina 8 (IL-8), citocina pro-inflamatoria, e super-expressa pelos fibroblastos durante o desenvolvimento do tecido de granulacao, acelerando o processo de cicatrizacao. Como o queloide resulta de uma reparacao tecidual anormal apos lesao da pele, o presente estudo teve por objetivo determinar a expressao dos receptores da IL-8, CXCR1 e CXCR2, e a capacidade proliferativa, pelo ciclo celular, dos fibroblastos queloideanos cultivados e extraidos ex vivo, por citometria de fluxo. Fibroblastos de cicatriz queloideana e de pele normal foram obtidos de 21 pacientes da raca negra, com idade variando entre 10 e 40 anos, de lesoes com ate 2 anos de evolucao. Em nosso estudo constatamos expressao reduzida dos receptores para a IL-8, CXCR1(35,7%±11,2) e CXCR2 (27,8%±11,3), em fibroblastos de cicatriz queloideana cultivados, comparando com a pele normal (44,1±16,2 e 46,3±27,1 respectivamente). Entretanto, essa diferenca so foi significante para o receptor CXCR2. A baixa expressao desses receptores poderia ser decorrente da atividade de metaloproteinases, que regulam a expressao de proteinas da superficie celular, atraves de clivagem enzimatica, ou a capacidade reduzida de internalizacao e a reciclagem de receptores, mantida por filamentos de actina do citoesqueleto, que nos fibroblastos do queloide estao diminuidos. Em relacao ao ciclo celular de fibroblastos cultivados do queloide e da pele normal, verificamos diferencas nao significantes da capacidade de replicacao (fase S do ciclo celular) e de apoptose. No queloide observamos significante aumento de celulas na fase G2/M, indicando aumento da velocidade de divisao celular...(AU) A keloid is a benign fibrous tumor that occurs during wound healing in genetically predisposed individuals. Healing is a complex biological process and depends on the interaction of different tissue structures and a great number of resident and infiltrative cell types. The interleukin-8 (IL-8), a proinflammatory chemokine, showed higher expression in fibroblasts during the development of the granulation tissue, promoting more rapid tissue maturation. Since keloids result from abnormal wound healing, the objective of the present study was to determine the expression of CXCR1 and CXCR2, IL-8 receptors, and the proliferation capacity, throughout the cell cycle, of the keloid fibroblasts extracted ex vivo and those submitted to in vitro cultivation. Normal skin and keloid scar fibroblasts were obtained from 21 African-Brazilian patients, aged from 10 to 40 years, whose lesions had evolved for no longer than 2 years. Expression of receptors and the cell cycle was assessed by flow cytometry. We showed lower expression of the CXCR1 (35,7% ± 11,2) and CXCR2 (27,8%±11,3) in keloid fibroblasts, when compared with normal skin (44,1 ± 16,2 e 46,3 ± 27,1 respectively), but the difference was not significant for the CXCR1 receptor. This lower expression of IL-8 receptors in keloid fibroblasts could be due to the action of metalloproteinases, which regulate the surface protein enzymatically, or fibroblastic cytoskeleton conditions, which influence receptor internalization and recycling. The distribution assessment of cell cycle phases of fibroblasts cultivated from keloid scars and normal skin did not show significant difference in replication capacity and apoptosis. The keloid fibroblasts presented a significantly higher proportion of cells in the G2/M phase, suggesting higher rate of cell division. To confirm these results we studied the cell cycle of fibroblasts extracted ex vivo, now separated by central and peripheral portions of keloid and normal skin...(AU)