异鼠李素激活Sirt1/PGC-1 α 信号通路抑制MPP + 诱导的SH-SY5Y细胞损伤

研究异鼠李素（isorhamnetin，ISO）对1-甲基-4-苯基吡啶离子（1-methyl-4-phenylpyridiniumion，MPP+）损伤SH-SY5Y细胞的保护作用及机制。建立MPP+损伤SH-SY5Y细胞模型，MTT和LDH法检测细胞活力，并测定细胞内超氧化物歧化酶（superoxidedismutase，SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase，GSH-Px）的活性，考察细胞氧化应激水平。应用DCFH-DA和MitoSOX荧光探针检测细胞内活性氧自由基（ROS）和线粒体内超氧化物水平，应用JC-1检测线粒体膜电位变化。Western blot和免疫荧光测定细胞中沉默信息调节因子2相关酶1（silent mating type information regulation 2 homolog 1，Sirt1）和过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅助激活因子1α（peroxisome proliferator-activatedreceptor γ coactivator-1α，PGC-1α）的蛋白表达，并且采用Western blot对凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2的表达进行检测。500 μmol·L-1MPP+损伤导致SH-SY5Y细胞存活率显著降低为52.46%，LDH释放量显著增加至417.63%。5和15 μmol·L-1 ISO通过增加Sirt1和PGC-1α的表达，减轻MPP+诱导的SH-SY5Y细胞损伤，降低LDH释放，显著减少MPP+诱导的细胞总ROS增加，降低线粒体内超氧化物水平，抑制线粒体膜电位下降，其细胞存活率分别增加到61.61%和67.55%。此外，ISO能够降低MPP+损伤所致Bax升高，抑制Bcl-2的降低，抑制MPP+引起的SH-SY5Y细胞凋亡。而ISO所介导的细胞凋亡抑制，能够被Sirt1特异性抑制剂Sirtinol所逆转。ISO通过激活Sirt1/PGC-1α信号途径，减轻氧化应激损伤，抑制细胞凋亡，发挥神经细胞保护作用。