Primer informe de Typhlocybinae como vectores potenciales de fitoplasmas en Cnidoscolus chayamansa (Miller) I.M. Johnst. (chaya) en Cuba

El objetivo del trabajo fue identificar los saltahojas presentes en plantas de chaya (Cnidoscolus chayamansa (Miller) I.M. Johnst.) e indicar la presencia de fitoplasmas en los insectos y las hojas con sintomas. Se recolectaron 40 saltahojas adultos y 50 hojas de tres plantas con sintomas asociados a fitoplasmas en el municipio 10 de Octubre, provincia La Habana, Cuba, durante el periodo de febrero a abril de 2015. Para la identificacion de los saltahojas se utilizaron claves dicotomicas, luego de realizar montajes de estos insectos en portaobjetos planos, bajo un microscopio estereoscopico Stemi DV4 y analizarlos en Microscopio AxioLab. A1 con monitor y camara fotografica acoplada. Los fitoplasmas se detectaron mediante la extraccion del acido desoxirribonucleico (ADN) por el metodo de CTAB 2%, con cebadores universales para la amplificacion generica de la region ADNr 16S (R16mF2/R16mR1, R16F2n\R16R2). Para la primera amplificacion se empleo la combinacion de los iniciadores universales R16mF2 y R16mR1 y para la reaccion anidada R16F2n/ R16R2. Para confirmar los resultados alcanzados, los productos de la digestion se analizaron en una camara de electroforesis en un gel de agarosa (1%) y se compararon con los controles positivos de fitoplasmas, obtenidos de plantas de Catharanthus roseus (L.) G. Don. Los saltahojas identificados fueron Empoasca canavalia DeLong y Empoasca papayae Oman. Se encontro la presencia de fitoplasmas en hojas sintomaticas y en los insectos. La determinacion de las dos especies de saltahojas y de fitoplasma en chaya y en insectos constituyen los primeros informes en Cuba. Palabras clave: Cnidoscolus chayamansa, Typhlocybinae, Empoasca, fitoplasmas. First report of Typhlocybinae as potential vectors of phytoplasmas in Cnidoscolus chayamansa (chaya) in Cuba ABSTRACT: With the aim of identifying the presence of phytoplasmas in insects and leaves, forty leafhopper adults and 50 leaves of three plants with symptoms associated with phytoplasmas, were collected at the municipality of10 de Octubre, Havana, from February to April 2015. For leafhopper taxonomical identification by using dichotomic keys, they were mounted on flat slides under a Stemi DV4 stereo microscope and observed under an AxioLab. A1 microscope with a monitor and camera attached. Phytoplasmas were detected by extracting the DNA by the 2% CTAB method and using universal primers for the generic amplification of the region ADNr 16S (R16mF2/R16mR1, R16F2n\R16R2). For the first amplification, the combination R16mF2 and R16mR1 was used, and R16F2n/ R16R2 for the nested reaction. The products of amplification were analyzed by electrophoresis on agarose gel (1%). The profiles obtained were compared with phytoplasma positive controls from Catharanthus roseus (L.) G. Don. plants. The leafhoppers identified were Empoasca canavalia DeLong and Empoasca papayae Oman, and the presence of phytoplasma was found in leaves with symptoms as well as in the insects. The presence of these two leafhopper species and phytoplasmas in chaya and insects are the first reports in Cuba. Key works: Cnidoscolus chayamansa, Typhlocybinae, Empoasca, phytoplasmas.