分子印章法DNA芯片的合成——II. 接触压印反应在片合成寡核苷酸

研究了分子印章法DNA芯片在片合成技术中的压印化学合成过程, 提出了压印偶联反应和压印脱二对甲氧基三苯基阳离子(DMT)反应合成寡核苷酸的2种方案, 并对其合成产率的差异进行了比较. 由于单次压印偶联反应比压印脱DMT反应合成效率高且所需时间短, 故选择压印偶联反应来合成寡核苷酸及其阵列并对其工艺进行了优化. 实验表明压印偶联反应的合成效率高, 从第6个核苷开始偶联效率接近100%; 压印2次比压印1次的偶联效率高且更均匀; 压印3次及3次以上除更均匀外对偶联效率的改善不明显; 玻璃载片经多次压印后对偶联反应的影响不大. 用压印偶联反应的方法成功合成出20 mer的寡核苷酸探针.