HPV16 E2与IL-12联合基因疫苗的免疫效果初步研究

目的将HPV16E2与IL-12真核表达载体联合免疫小鼠,检测小鼠产生的特异性体液免疫和细胞免疫应答水平,为HPV16诱发的宫颈癌治疗性核酸疫苗的研制奠定实验基础。方法40只BALB/c小鼠随机分成PBS组、pcD-NA3.1（＋）空质粒组、pcDNA3.1（＋）/IL-12组、pcDNA3.1（＋）/HPV16E2组以及pcDNA3.1（＋）/HPV16E2＋pcD-NA3.1（＋）/IL-12联合组,每组8只,共免疫4次,每2周1次。于免疫前1d及第8周采血,分离血清,-20℃保存;颈椎脱臼处死小鼠,无菌取脾脏,制备脾细胞悬液。ELISA法测定小鼠血清HPV16E2IgG抗体水平及脾细胞培养上清IFN-γ、IL-4水平;MTT比色法检测脾淋巴细胞的增殖。结果免疫8周后,血清IgG抗体A450值E2组和联合组与PBS组和空质粒组比较差异有统计学意义（P〈0.05）;但在每个时间点,联合组与E2组比较差异无统计学意义（P〉0.05）。IL-12组、E2组、联合组脾淋巴细胞培养上清中的IFN-γ和IL-4含量与PBS组和空质粒组比较差异有统计学意义（P〈0.05）;联合组与E2组比较IFN-γ含量差异有统计学意义（P〈0.05）,两组的IL-4含量差异无统计学意义（P〉0.05）。IL-12组、E2组、联合组脾淋巴细胞SI值与PBS组和空质粒组比较差异有统计学意义（P〈0.05）;联合组与E2组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论HPV16E2单基因疫苗及其与IL-12联合基因疫苗能刺激小鼠产生特异性抗体,脾淋巴细胞培养上清IFN-γ含量升高,且联合基因疫苗优于E2单基因疫苗。