精子蛋白32(sp32)/OY-TES-1在生精细胞中的分布及其抗体的血清学检测
2009
目的:了解精子蛋白(sperm protein32,sp32)/OY-TES-1蛋白在生精细胞中的分布及抗sp32/OY-TES-1抗体在不育症患者血清中的出现情况。方法:用重组表达的OY-TES-1麦芽糖融合蛋白免疫新西兰白兔,制备sp32/OY-TES-1多克隆抗体,且经纯化鉴定后用于检测人精子和大鼠正常睾丸组织;用ELISA试验,检测不育症患者和正常人血清中抗sp32/OY-TES-1抗体。结果:①免疫后的兔血清含高效价的sp32/OY-TES-1多克隆抗体,并可与OY-TES-1麦芽糖融合蛋白特异性地结合;②免疫组化染色显示人精子头部、大鼠精子和精子细胞中呈免疫反应阳性。③ELISA检测结果显示76例正常人血清中无抗sp32/OY-TES-1抗体,而不育症患者血清其抗体的阳性率高达70.77%(46/65),并有较高的抗体水平。结论:本实验制备的sp32/OY-TES-1多克隆抗体可用于大鼠睾丸生殖细胞的检测,为后续用大鼠进行sp32/OY-TES-1的相关研究奠定了基础。sp32/OY-TES-1特异性地表达于精子细胞和精子,其抗体的出现意义与不育症的关系有待进一步研究。
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