NOVEDOSAS INTERACCIONES DEL VIRUS DENGUE 2 MEDIADAS POR EL DOMINIO III DE LA PROTEÍNA DE LA ENVOLTURA CON PROTEÍNAS DEL PLASMA HUMANO

Antecedentes: El virus dengue (VD) depende para multiplicarse de la red de interacciones que establece con las moleculas del hospedero. Siendo la sangre el tejido donde se llevan a cabo los primeros ciclos de multiplicacion viral, las interacciones de las proteinas estructurales del VD con proteinas del plasma sanguineo resultan decisivas para el curso de la infeccion y contribuyen a las marcadas diferencias observadas en el desarrollo de sintomas clinicos en las personas infectadas con el virus. Los viriones del VD contienen 3 proteinas estructurales: envoltura (E), membrana y capsida. De estas, la proteina E es la mas expuesta en la superficie de las particulas virales y juega un papel determinante en los eventos tempranos de la infeccion del virus a las celulas. El dominio III de la proteina E se ha identificado como una region de gran importancia funcional para el virus. El plegamiento tipo inmunoglobulina que presenta este dominio lo hace una region de potenciales interacciones con proteinas del plasma sanguineo. Problema que se ha resuelto de acuerdo con los objetivos del trabajo: En el trabajo se obtiene informacion sobre la red de factores de interaccion virus-huesped en el plasma humano. Se identifican interacciones del VD con proteinas de origen humano que juegan papeles esenciales en procesos que se encuentran alterados en las personas que sufren las formas mas severas de la enfermedad denominado en la actualidad Dengue Severo (DS). Se identifican proteinas como potenciales dianas novedosas en el desarrollo de medicamentos y/o estrategias clinicas para modular el desarrollo de los sintomas en el DS, asi como en la identificacion de biomarcadores para el pronostico del curso de la infeccion. Se definen regiones de importancia funcional en la superficie del dominio III de la proteina E del VD que pueden servir de base para trabajos de diseno basado en estructura de moleculas con potencial antiviral. Resultados: El trabajo incluye el estudio de elementos estructurales del dominio III de la proteina E relevantes para la interaccion con proteinas de la superficie de las celulas de mamiferos. Se presenta ademas un analisis de conservacion de los aminoacidos de la superficie expuesta del dominio III y la relacion con dos tipos de interacciones de gran importancia para el establecimiento de la infeccion en humanos: interaccion con receptores celulares y reconocimiento de la respuesta de anticuerpos. Utilizando una proteina recombinante que comprende el dominio III de la proteina E del VD2 (DIIIE2) se realizaron experimentos de cromatografia de afinidad con diferentes preparaciones de plasma humano que permitieron la identificacion por espectrometria de masas de varias moleculas candidatas a establecer interacciones del virus durante la infeccion a las personas. El trabajo incluye la validacion de varias de estas interacciones mediante ELISA y la caracterizacion mas detallada de una de estas, especificamente la interaccion con la alfa 2-macroglobulina., un conocimiento que puede ayudar a mejorar el tratamiento medico de los pacientes y el desarrollo de una terapia antiviral especifica.