Analyses de macrophages : de la lipidomique à l'oxylipidomique

L’atherosclerose est un phenomene inflammatoire caracterise par un depot sur les arteres de macrophages gorges de cholesterol egalement appeles cellules spumeuses. Actuellement, trois principales molecules membranaires sont decrites comme assurant la sortie du cholesterol libre, dont l’ABCA1 (ATP Binding Cassette A1) qui joue un role physiologique important. Le but de ce travail est d’etudier l’impact de l’incorporation d’acides gras ω3 et celui de LDL modifiees sur la composition des phospholipides membranaires et d’etablir des liens entre la modification de composition des phospholipides et l’alteration du fonctionnement de l’ABCA1. Une etude lipidomique a ete menee, en utilisant des methodes de chromatographie couplees a la spectrometrie de masse. Les analyses ont ete realisees au moyen d’un systeme de chromatographie liquide en phase normale (NP-LC) permettant la separation des differents phospholipides. La detection a ete realisee a l’aide de spectrometres de masse (MS) basse et ultra-haute resolution, ainsi que d’un detecteur a aerosol charge. La chromatographie en phase gazeuse permet de connaitre les proportions relatives d’acides gras. Ces techniques ont ete utilisees pour realiser une etude sur les parametres de pretraitement (en amont du traitement des signaux analytiques), de decrire le lipidome de differents types de macrophages et d’etablir les modifications de composition des phospholipides lors d’ajout chronique d’acides gras ω3 et/ou de LDL modifiees. Les resultats obtenus ont permis de definir une methode de pretraitement de donnees LC-MS, d’evaluer la composition de trois types de macrophages et de modeliser les variations de l’efflux du cholesterol avec les modifications phospholipidiques observees pour les macrophages non spumeux. A partir de ces elements, des thematiques communes, chimie biologie, ont pu aussi etre identifiees comme l’analyse de «l’oxylipidome».