日本血吸虫信号蛋白14-3-3在虫卵的定位及其免疫诊断价值初探

目的探讨日本血吸虫信号蛋白14—3—3（sj14—3—3）在虫卵内的定位和重组Sj14—3-3（rsj14—3—3）的免疫诊断价值。方法从日本血吸虫尾蚴感染42d的兔肝脏中分离虫卵，用逆转录聚合酶链反应（1it—PCR）检测sj14．3．3基因在虫卵期的转录水平；兔肝组织石蜡切片免疫组化染色，观察内源性Sj14—3—3在虫卵内的分布和表达丰度。利用纯化的rSj14-3-3和可溶性虫卵抗原（SEA），采用间接酶联免疫吸附试验（ELISA）检测急、慢性血吸虫病患者和正常人血清。结果RT-PCR从日本血吸虫成熟虫卵中检出760bp左右的基因片断；免疫组化显示Sj14-3-3主要分布在虫卵内毛蚴的体壁和两边的侧腺。检测急性、慢性患者和正常人血清抗rSj14-3—3抗原的抗体阳性率分别为91．0％、78．9％、0．0％；上述标本中抗SEA抗体的阳性率分别为97．4％、88．9％和2．5％。结论用ELISA检测抗SEA抗体和rSj14-3-3抗体诊断血吸虫病具有高度的特异性和敏感性，而Sj14—3-3在成熟虫卵阶段高表达，可能是SEA的主要组分，具有实用价值。