棉花 GhDMT3 的功能验证及生物信息学分析

通过构建棉花GhDMT3的VIGS沉默载体并侵染棉花，探究该基因在棉花和高等植物中的功能。采用生物信息学方法对棉花DNA甲基转移酶基因GhDMT3（CotAD_46796）的DNA序列结构特性、该基因编码的蛋白质的理化性质、疏水性和蛋白二级结构等方面进行分析。克隆该基因，并构建pYL156：GhDMT3沉默载体。蛋白质相对分子质量为71 107.02 kD，等电点为4.85，不稳定系数为36.33。不同胁迫处理（冷、干旱）VIGS沉默GhDMT3的棉花幼苗表现出明显的表型差异。qRT-PCR的表达模式分析发现，不同胁迫下pYL156侵染的棉花中不同部位表达量没有变化，用pYL156：GhDMT3侵染过的棉花中GhDMT3转录水平与对照相比明显下降。与未沉默GhDMT3的棉花幼苗相比，沉默GhDMT3的棉花幼苗抗逆性显著增强。