2-NBDG用于乳腺癌MDA-MB-231细胞荧光检测研究

目的：评价荧光2-N[7-硝基苯-2-乙二酸,3-4羟氨基]（2-[N-（7-nitrobenz-2-oxa-1,3-diazol-4-yl）amino],NBD）标记2-脱氧葡萄糖（2-deoxyglucose,2-DG）即2-NBDG,靶向探测高表达葡萄糖转运蛋白1（Glut1）的MDA-MB-231乳腺癌细胞可行性。方法：2-NBDG分别孵育接种在6孔板里的人乳腺癌MDA-MB-231细胞1,10,20,40 min后,荧光显微镜观察并摄像;为了进行竞争性抑制,用D型葡萄糖预先孵育细胞30 min后再加入2-NBDG孵育20 min,荧光显微镜观察并摄像。同时用流式细胞仪分析孵育不同时间及有无竞争抑制的细胞吸收2-NBDG量的差异。结果：荧光成像显示2-NBDG积聚在MDA-MB-231细胞膜和细胞质内,加入D型葡萄糖竞争抑制后,荧光信号显著减弱;流式细胞仪分析表明最初的1 min 2-NBDG被肿瘤细胞迅速摄取（MDA-MB-231细胞自发荧光强度为2.66±0.09,2-NB-DG孵育1 min后荧光强度为4.04±0.18）,10 min时吸收持续增加（荧光强度为5.64±0.17）,20 min吸收最明显（荧光强度为25.10±0.57）;加入D型葡萄糖竞争抑制后,细胞摄取2-NBDG的荧光强度降低46%。结论：2-NBDG能迅速被高表达Glut1的MDA-MB-231乳腺癌细胞靶向吸收,有望成为葡萄糖代谢的光学标记物来检测高代谢的恶性肿瘤。