抑制 miR-29a-3p 表达对小鼠巨噬细胞凋亡的影 响 及 机 制

2018 
目的 研究 miR-29a-3p 下调表达对小鼠巨噬细胞凋亡及相关基因表达的影响,为探讨结核病发病机制、研发新的诊断与治疗方法提供依据。 方法 将重组抑制载体pEZX-AM02-miR-29a-3p转染RAW264.7细胞,24、36和48 h荧光显微镜观察转染效率,Real time-PCR法检测 miR-29a-3p 及凋亡相关基因 caspase3 、 caspase7 、 caspase8 、 Bcl-2 、 Mcl-1 和 Bax 的表达水平,流式细胞术检测RAW264.7细胞的凋亡率。 结果 重组抑制载体转染后,细胞内 miR-29a-3p 表达水平明显下降;而 caspase7 、 caspase8 、 Bcl-2 、 Mcl-1 和 Bax 等基因的表达出现不同程度的上调;流式细胞术分析发现随着转染时间延长,细胞凋亡率增加,且36 h凋亡率最高。 结论 pEZX -AM02-miR-29a-3p重组载体可抑制小鼠巨噬细胞中 miR-29a-3p 的表达,通过靶向上调 caspase7 、 caspase8 、 Bcl-2 和 Mcl-1 等基因的表达促进巨噬细胞的凋亡。
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