Živé vakcíny, vrozená imunitní odpověď a kolonizace kuřat salmonelami.

Oslabene kmeny Salmonella enterica lze využit pro expresi heterolognich antigenů. Schopnost sekrece proteinů vsak u atenuovaných kmenů salmonel nebyla studovana. V prvni casti sve prace jsem proto porovnavala proteinovou sekreci u mutantů rfaL, rfaG, rfaC, lon, htrA, clpP, aroA, phoP a spoT-relA ve kmenech S. enterica serovar Typhimurium a Enteritidis. Defekt v sekreci proteinů byl zaznamenan u mutantů rfaG, rfaC, lon a spoT-relA, ktere jsou tudiž nevhodne jako vektory pro expresi a sekreci heterolognich antigenů. Podrobněji jsem se zabývala mutanty S. Enteritidis a Typhimurium rfaC, rfaG a rfaL s defektem v synteze lipopolysacharidu (LPS). U vsech tři rfa mutantů byla zjistěna narusena motilita na polotuhem LB agaru, ackoliv rfaL mutant secernoval bicikový protein FliC. Mutantni kmeny rfaC a rfaG žadne extracelularni proteiny, vcetně flagelinu, nesecernovaly. U rfaC mutanta S. Typhimurium vsak dochazelo k expresi FliC, detekovanemu v cytoplazmě pomoci western blot analýzy, ve stejnem množstvi jako u divokeho kmene. Oligosacharidove jadro LPS je nezbytne pro sestaveni struktury biciku a kompletni O-antigen LPS je potřebný pro spravnou funkci biciku. Striktni hygienicka opatřeni v chovech drůbeže přinaseji kromě nesporných výhod i možne problemy. Kuřata v cistých lihnich nepřichazeji do kontaktu s rodicovskou mikroflorou a po vylihnuti mohou být kolonizovana nahodnými bakteriemi z prostředi. V druhe casti prace jsem proto sledovala vývoj střevni mikroflory, imunitni odpověď na kolonizaci střeva a infekci Salmonella Enteritidis u kuřat různeho věku. Komplexnost střevni mikroflory u kuřat postupně narůstala od 1. do 19. dne života. Během prvnich 3 dnů po vylihnuti bylo střevo kuřat chraněno zvýsenou expresi β-defensinů, pote jejich exprese klesla a 4. den života byla nahrazena maximalni expresi cytokinů IL-8 a IL-17. Ve věku 4 dnů dochazelo u kuřat k přechodnemu, mirnemu, fyziologickemu zanětu a tim i k vyzravani imunitniho systemu střeva, ktere se projevilo přechodem z Th-1 imunitni odpovědi u 1- a 4-dennich kuřat infikovaných S. Enteritidis (charakterizovanou indukci IFN-γ a iNOS) na Th-17 imunitni odpověď u 16-dennich kuřat infikovaných S. Enteritidis (charakterizovanou indukci IL-17 a IL-22). Zrani imunitniho systemu střeva tak zvysuje rezistenci kuřat k infekci salmonelami a pravděpodobně i jinými patogeny.