灰葡萄孢菌及其抗短梗霉素突变体 AURI 基因序列及其酶活性的分析

目的探讨灰葡萄孢菌及其抗AbA突变体 AUR1 基因序列与IPC合成酶活性的关系。 方法通过分子生物学方法测定野生型及突变体的 AUR1 的基因序列，高效液相荧光色谱法测定IPC合成酶活力，苯甲酰化法测定神经酰胺含量。 结果 AUR1 基因序列和IPC合成酶活性测定表明4株不同的突变体均产生了对IPC合成酶抑制剂AbA的抗性，它们的突变类型为：(1) AUR1 序列中缺失内含子；(2) AUR1 序列中缺失内含子和P155S氨基酸突变；(3) AUR1 序列中缺失内含子和V33A的氨基酸突变；(4) AUR1 序列中缺失内含子和P155S、S177P、F237L的氨基酸突变。 AUR1 缺失内含子和既缺失内含子又伴随P155S氨基酸突变的突变体的AbA抗性较强。神经酰胺含量测定表明野生型IPC合成酶被抑制，导致神经酰胺积累，而突变体则能抵抗AbA对IPC合成酶的抑制作用。 结论 AUR1 基因中的内含子对IPC合成酶的调控起重要的作用。AbA通过抑制IPC合成酶引起神经酰胺积累，IPC合成酶是鞘脂代谢的关键酶。