Biểu hiện và thu nhận enzyme T4 DNA ligase tái tổ hợp trong E. coli

Trong nghien cứu nay chung toi trinh bay kết quả cảm ứng biểu hiện va tinh chế thu nhận enzyme T4 DNA ligase tai tổ hợp. Plasmid tai tổ hợp pET16b-T4Dnl mang gen gp30 ma hoa enzyme T4 DNA ligase. Thẻ 10xHis được gắn vao đầu N của protein T4 DNA ligase để hỗ trợ cho việc tinh chế thu nhận. Chung toi tiến hanh biến nạp plasmid pET16b-T4Dnl vao tế bao E. coli BL21(DE3). Sau đo tiến hanh cảm ứng biểu hiện protein 10xHis-T4Dnl bằng IPTG va tinh chế thu nhận bằng phương phap sắc ký ai lực với cột Ni-NTA. Kết quả biểu hiện va tinh chế được xac nhận bằng SDS-PAGE va lai Western. Protein thu nhận được thử hoạt tinh bằng phương phap nối cac đoạn DNA λ/HindIII.