利用Duet系列共表达载体构建工程菌生物合成3-羟基丁酸（3HB）

通过PCR获得β-酮基硫解酶（PhaA）、乙酰乙酰辅酶A还原酶（PhaB）和硫酯酶（TesB）的基因phaA，phaB和tesB。以pACYCDuet-1、pRSFDuet-1、PET30a（＋）为载体，以大肠杆菌表达型宿主E．coliBL21（DE3）为宿主菌，分别构建了两株表达体系不同的工程菌，建立了R-3-羟基丁酸（3HB）的代谢途径，实现3HB的生物合成。将两株工程菌分别进行诱导表达及发酵，结果表明，三个基因均可在表达型宿主BL21（DE3）中进行活性表达，通过三个酶的连续催化生物合成3HB，并且三个基因的均衡表达更有利于3HB的生物合成。将phaAB基因簇构建在ACYCDuet-1上，tesB基因构建在RSFDuet．1上，获得的工程菌BL21（AAB4-RB），3HB产量可达到1．8g／L。