Alteraciones del gen MYC en linfomas agresivos de células B

En la presente tesis doctoral hemos estudiado diferentes aspectos metodologicos en la caracterizacion del gen MYC de aplicacion practica en el diagnostico, tratamiento y valoracion pronostica de linfomas agresivos de celulas B, y hemos aplicado estos conocimientos metodologicos en un subgrupo de linfomas concreto: los linfomas primarios del sistema nervioso central (CNS-DLBCL). En el primer trabajo de la tesis demostramos que el gen MYC se encuentra reordenado en un subgrupo de linfomas difusos de celulas grandes B (DLBCL), ademas de linfomas de Burkitt (BL) y linfomas inclasificables de caracteristicas intermedias (BCLU). La presencia de la traslocacion del gen MYC se asocio a una mayor expresion proteica que puede detectarse mediante tecnicas inmunohistoquimicas (70% vs. 28% en la serie global y 61% vs. 28% en DLBCL). La sobreexpresion de MYC no se correlaciono con la presencia de ganancia de copias del gen, con otros marcadores inmunohistoquimicos (CD10, BCL6, BCL2 y MUM1), el indice de proliferacion celular (Ki67) o el subtipo molecular segun el algoritmo de Hans. Por otro lado, observamos que un subgrupo de DLBCL sin reordenamiento del gen MYC expresa niveles proteicos elevados, los culaes deben obedecer a mecanismos alternativos al reordenamiento genico. En el segundo trabajo de la tesis comparamos los resultados obtenidos al estudiar el estado del gen MYC mediante diferentes sondas comerciales de FISH: una sonda de fusion IGH-MYC y dos sondas de separacion. En los 13 casos con reordenamiento IGH-MYC, la traslocacion pudo detectarse con las tres sondas evaluadas. Por el contrario, en 7 de los 13 casos (54%) con reordenamiento no-IGH-MYC (IGK-MYC, IGL-MYC o no-IG-MYC), la traslocacion pudo detectarse inequivocamente con una unica sonda (de separacion), siendo el resultado de las otras sondas no concluyente o negativo (falso negativo). Por otro lado, 9 de los 15 casos (60%) con un patron sugestivo de traslocacion no-IGH-MYC con la sonda de fusion eran debidos a ganancia de copias del gen MYC, y no a la presencia de reordenamiento, tal y como se demostro con las dos sondas de separacion (falso positivo). En base a los datos obtenidos en este estudio, proponemos una aproximacion doble con el uso de una sonda FISH de fusion y otra de separacion a la hora de valorar la presencia de alteraciones en la banda cromosomica 8q24. Finalmente, en el ultimo trabajo de la tesis evaluamos el papel del reordenamiento del gen MYC junto con los genes BCL2 y BCL6 y su expresion proteica en el CNS-DLBCL y su posible valor pronostico. En una serie de 42 CNS-DLBCL observamos unos niveles elevados de expresion del gen MYC en el 43% de los casos, y esta expresion elevada se correlaciono con una menor supervivencia global (OS). La expresion de niveles elevados de MYC no era debida a la presencia de reordenamientos del gen, ya que no se demostro reordenamiento del gen MYC en ningun caso. Los linfomas con una coexpresion de niveles elevados de MYC y BCL2 mostraron una menor OS, si bien las diferencias no fueron estadisticamente significativas. En ningun caso se detecto la traslocacion del gen BCL2. El gen BCL6 se encontraba reordenado con frecuencia (44% de los casos), pero la presencia de traslocaciones no se correlaciono con el pronostico. En conclusion, en este estudio demostramos que el CNS-DLBCL con frecuencia presenta sobreexpresion del gen MYC, y que esta sobreexpresion identifica un subgrupo de linfomas con comportamiento mas agresivo. Por lo tanto, el estudio de la expresion del gen MYC mediante inmunohistoquimica podria ayudar a una valoracion pronostica mas precisa en el CNS-DLBCL