Analise da proliferação celular e expressão de colageno e suas proteinas chaperones, citocinas e metaloproteinas de matriz e seus inibidores teciduais em fibroblastos gengivais de pacientes com fibromatose gengival herditaria

Fibromatose gengival hereditaria (FGH) e uma condicao rara caracterizada por um aumento gengival generalizado com crescimento lento e progressivo. Para elucidar algumas das caracteristicas regulatorias que resultam nesta condicao, quatro linhagens celulares de fibroblastos provenientes de individuos de uma mesma familia com FGH foram isoladas e caracterizadas em relacao ao comportamento prol proliferativo, producao, e expressao de colageno e suas proteinas chaperones, expressao de MMPs e TIMPs e producao de citocinas. Fibroblastos de gengiva normal (GN) e FGH em condicoes de subconfluencia celular apresentaram tipicas caracteristicas morfologicas, mas em condicoes de saturacao da densidade, os fibroblastos de FGH apresentaram dimensoes menores que as celulas controle. Cinco diferentes ensaios de proliferacao celular mostraram que a relacao de proliferacao foi significantemente maior em fibroblastos de FGH. A producao e expressao de Hsp47 e tambem aumentada em fibroblastos de FGH em paralelo com o aumento na producao de colageno. Em adicao, a expressao de Hsp47 e regulada por estresse celular e pro-peptideos correspondendo as regioes da porcao N-terminal das cadeias `alfa´1 (I). A producao de citocinas foi detectada por ELlSA utilizando anticorpos especificos para TGF-` beta ´31, IL-6, IL-1 ` beta ´ e TNF- `alfa ´. Em fibroblastos de FGH a producao de TGF-` beta ´ 1 e IL-6 foi estatisticamente maior que em fibroblastos normais (p<0,013 e p< 0,0035 respectivamente), enquanto que IL-` beta ´ 1 e TNF- `alfa ´ nao foram detectadas em todos as linhagens celulares. A expressao e producao de MMP-1 e MMP-2, como revelada por RT -PCR e zimografia, foram significantemente menores em fibroblastos de FGH comparando com celulas de GN. Por outro lado, a expressao de TIMP-1 e TIMP-2 foi ligeiramente maior em fibroblastos de GN. A neutralizacao de TGF- ` beta ´ 1 com anticorpos especificos elevou os niveis de expressao e producao de MMP-1 e dramaticamente reduziu os niveis de MMP-2, enquanto que os de niveis de TIMPs nao foram alterados. Estes resultados sugerem que a pato genese do aumento gengival de individuos com FGH e possivelmente resultado de uma associacao de fatores incluindo alterado comportamento proliferativo, exacerbada sintese de colageno e Hsp47, desregulacao no balanco proteolitico e elevada producao de citocinas Ab