Étude de l’activation plaquettaire au cours d’un sepsis expérimental chez la souris

Introduction Le choc septique est une maladie grave, dont l’incidence est elevee et qui est assortie d’une mortalite de 40 % en reanimation [1] . La defaillance multiviscerale qui en decoule est due en partie a la formation de thrombi dans la microcirculation [2] . Nos objectifs etaient d’etudier l’etat d’activation des plaquettes dans ce modele ainsi que leur contribution a la formation des thrombi dans la circulation dans un modele murin de ligature et perforation caecale (CLP) [3] . Materiel et methodes Nous avons mis en place un modele murin valide de sepsis correspondant a une peritonite (CLP) et compare le groupe des souris Sham a celui des souris CLP. L’hemogramme des souris a ete realise a differents temps et nous avons etudie la reactivite et le niveau d’activation des plaquettes par diverses techniques : agregometrie, dosage des eicosanoides (en particulier du metabolite stable du thromboxane A2 (TXA2), le TXB2), cytometrie de flux (marquage de la forme activee de la glycoproteique α IIb β 3 ) et immunohistologie (anticorps anti-α IIb specifique des plaquettes pour visualiser les thrombi dans les organes). Resultats Dans ce modele de peritonite nous montrons une chute importante du taux de leucocytes (diminution de 71,8 % du taux initial) et une diminution du taux de plaquettes circulantes des la 2 e heure apres l’induction du sepsis (540 ± 42 G/L a H0 versus 288 ± 30 G/L a H2), confirmee a 4 heures de la chirurgie. Une augmentation de l’agregabilite plaquettaire a ete retrouvee chez les souris CLP en reponse a une stimulation par un analogue du thromboxane A2 (U46619). D’autre part, le taux plasmatique de TXB2, metabolite stable du TXA2 et marqueur circulant de l’activation plaquettaire, etait augmente d’un facteur 2,6 chez le groupe des souris septiques par rapport au groupe Sham (94,7 ± 17,8 pg/ml versus 36,6 ± 1,8 pg/ml) des la 2 e heure apres l’induction du sepsis (resultats confirmes a 48 h). L’etude en cytometrie de flux a montre que les plaquettes du groupe CLP exprimaient d’avantage la forme active d’α IIb β 3  que les plaquettes du groupe sham (moyenne de fluorescence (MFI) : 4370 ± 498 versus 2740 ± 95) suggerant une augmentation du niveau d’activation plaquettaire. L’analyse immunohistologique a revele la presence de thrombi riches en plaquettes dans les vaisseaux pulmonaires, cardiaques et hepatiques chez les souris CLP a la difference des souris sham ( Fig. 1 ). Discussion Le sepsis entraine une diminution precoce et prolongee des leucocytes et des plaquettes circulants ainsi qu’une augmentation des marqueurs d’activation plaquettaire (production de TXA 2  et changement de conformation de l’integrine α IIb β 3 ). Il existe des thrombi riches en plaquettes au niveau des vaisseaux de differents organes du groupe CLP ce qui pourrait contribuer a expliquer la chute du nombre de plaquettes circulantes de pres de la moitie dans ce groupe.