Análise de nucleosídeos, potenciais biomarcadores tumorais de câncer de próstata, por eletroforese capilar

O câncer esta entre as maiores causas de obitos no mundo, porem, se a enfermidade for detectada no inicio, grande parte dos casos pode atingir a cura. Os nucleosideos sao moleculas originadas da degradacao do RNA e suas concentracoes em fluidos biologicos sao alteradas na presenca de tumores devido a maior taxa de replicacao celular, portanto sao potenciais biomarcadores tumorais. A investigacao do perfil de tais metabolitos pode auxiliar no diagnostico e no tratamento do câncer. Neste trabalho, um novo metodo para a analise de nucleosideos em soro sanguineo por eletroforese capilar (CE-UV) no modo cromatografia micelar eletrocinetica capilar (MECK) foi desenvolvido e validado. O surfactante cationico brometo de cetiltrimetilamonio (CTAB) foi empregado, com consequente inversao do fluxo eletrosmotico. Os analitos foram extraidos da matriz de soro sanguineo atraves de extracao em fase solida (SPE) e um amplo estudo sobre estrategias de pre-concentracao foi realizado para obtencao de limites de quantificacao mais baixos e adequados. Sete padroes de nucleosideos mais o padrao interno foram separados em c.a. 25 min sob as condicoes de analise otimizadas, i.e. eletrolito de corrida composto por acido borico 30 mmol/L, CTAB 50 mmol/L e metanol 10% (v/v) em pH 9,90; tensao de -10 kV; temperatura de 20°C; injecao hidrodinâmica a 50 mbar por 120 s seguida por aplicacao 25 kV entre vials de eletrolito por 15 s; e capilar de silica fundida com 50 µm de diâmetro interno e 56 cm de comprimento efetivo. Foram atingidas eficiencias entre 4,3 ? 104 e 1,0 ? 105 e resolucao minima de 1,5. A metodologia foi validada em um pool de soro sanguineo de individuos sadios e foram obtidos limites de quantificacao entre 1,0 e 4,0 µmol/L, coeficientes de correlacao linear entre 0,9801 e 0,9969 e precisoes e exatidoes menores que 20%. O metodo foi aplicado a amostras de 60 individuos sadios e 66 portadores de câncer de prostata e um estudo quimiometrico foi realizado para avaliacao da potencialidade dos nucleosideos como biomarcadores tumorais, com obtencao de especificidade acima de 90%. Tal metodologia, portanto, pode ser empregada em conjunto com as ja bem estabelecidas para o diagnostico do câncer de prostata. Abstract