复苏因子E-DNA疫苗对BALB/C小鼠免疫效应的研究

目的：探索复苏因子E（RpfE）-DNA疫苗的小鼠免疫效果。方法：利用真核表达载体PCDNA3.1构建PCDNA3.1-RpfE重组质粒。将SPF级BALB/C小鼠随机分为5组,即空质粒组、RpfE质粒组、BCG组、生理盐水组、空白对照组,于0、3、6周先后3次免疫小鼠,在第3次免疫后3周,心脏取血ELISA方法检测血清RpfE IgG抗体效价、干扰素γ（IFNγ）水平;并行脾淋巴细胞培养,以RpfE蛋白刺激淋巴细胞,CCK-8法检测淋巴细胞增殖指数、ELISA方法检测上清诱导IFNγ和白介素12（IL-12）产生水平,乳酸脱氢酶试验检测小鼠脾细胞毒性T淋巴（CTL）杀伤效应。结果：（1）RpfE质粒组小鼠血清中RpfE抗体水平明显高于其他各组（P〈0.001）;RpfE质粒组IFNγ水平明显高于空质粒组、生理盐水组、空白对照组和BCG组（P〈0.01或P〈0.05）。（2）RpfE质粒组具有较强的刺激淋巴细胞增殖作用,CCK-8实验表明其增殖指数高于其他各组（P〈0.05）;上清ELISA检测表明IFNγ和IL-12产生水平也高于其他各组（P〈0.05）。（3）RpfE质粒组脾淋巴细胞特异性CTL杀伤性与其他各组比较有统计学意义（P〈0.05）。结论：RpfE-DNA疫苗可诱导小鼠的免疫应答,具有良好的体液和细胞免疫原性。