Effets comparés de la 25-hydroxy et de la 1,25-dihydroxy vitamine D sur la lignée d’adénocarcinome mammaire EO771 : approche in vitro

Introduction et but de l’etude La vitamine D (VD) a ete decrite comme un facteur ralentissant la croissance tumorale mammaire dans plusieurs modeles murins [1] , [2] . La 1,25-dihydroxy VD (1,25D) est la forme active de la VD generee par l’hydroxylation de la 25-hydroxy VD (25D) par la 1α-hydroxylase, enzyme codee par Cyp27b1. La 1,25D et la 25D sont catabolisees suite a une hydroxylation par la 24-hydroxylase codee par Cyp24a1. L’action antitumorale de la 1,25D est due a des effets genomiques grâce a sa liaison a son recepteur (VDR) et a des effets non genomiques via des voies de signalisation telles que les MAPK [3] . L’objectif de cette etude est de caracteriser in vitro l’impact de 25D et 1,25D sur la viabilite et l’expression des acteurs du metabolisme de la VD de la lignee EO771 d’adenocarcinome mammaire murine, precedemment testee in vivo dans un modele murin de carcinogenese [4] . Materiel et methodes Les cellules EO771 ont ete cultivees en presence de differentes doses infraphysiologique, physiologique et supraphysiologique de 25D (25, 75 et 125 ng/mL) ou de 1,25D (50, 150 et 300 pg/mL) a 37 °C et 5 % CO2. Apres 24 et 48 h d’incubation, la viabilite cellulaire par le bleu de Trypan et l’apoptose par marquage a l’annexine V-FITC/IP en cytometrie en flux, ont ete evaluees. Les expressions genique et proteique de Vdr, Cyp27b1 et Cyp24a1 ont ete mesurees respectivement apres 24 h et 48 h d’incubation. Les donnees ont ete traitees par ANOVA 2-voies suivi d’un test de Tukey. Resultats et analyse statistique La viabilite cellulaire est reduite de facon dose-dependante apres 24 h et 48 h d’incubation avec la 1,25D (p  Conclusion Nos resultats demontrent, pour la premiere fois a notre connaissance, que les cellules EO771 expriment la machinerie moleculaire leur permettant de repondre a des variations de concentrations en VD. La 1,25 VD exerce sur la lignee EO771 un effet antiproliferatif pouvant s’expliquer par une induction de l’apoptose renforcee par une surexpression du Vdr. Cet effet n’est pas retrouve avec la 25D, ce qui peut etre relie a la surexpression proteique de l’enzyme de catabolisme (Cyp24a1). Ainsi, dans nos conditions experimentales, les effets induits par la 1,25D et la 25D sont differents en lien probablement avec leurs specificites physico-chimiques et metaboliques modulant leurs cinetiques et modes d’action intracellulaires.