Efecto del almacenamiento en fase gaseosa sobre la viabilidad celular, la apoptosis y la actividad funcional en aortas de cerdo criopreservadas. Estudio preliminar

Resumen Objetivos Analizar las consecuencias del protocolo de congelacion y del metodo de almacenamiento utilizado sobre la actividad funcional, la estructura anatomo-patologica y el grado de apoptosis de las aortas abdominales de cerdo criopreserva-das durante seis meses, tras la descongelacion. Materiales y metodos Se obtuvieron injertos arteriales de cerdos y cada aorta se dividio en dos fragmentos. Grupo 1: segmentos en fresco o bien fijados en formaldehido tras la toma de la muestra (grupo control). Grupo 2: segmentos fijados tras incubacion antibiotica y criopreservacion durante seis meses para un estudio anatomopatologico y de apoptosis, o bien utilizados directamente tras su descongelacion para un estudio funcional. La incubacion antibiotica se realizo en medio de un cultivo RPMI suplementado con antibioticos. Despues de la incubacion antibiotica, la criopreservacion se llevo a cabo en medio RPMI con 10% de dimetilsul-foxido (DMSO). La tasa de enfriamiento fue de 1 °C/min, y el posterior almacenamiento se realizo en fase gaseosa. Resultados No hay diferencia en cuanto al grado de apoptosis en los dos grupos, ni diferencias significativas en el grado de fragmentacion de las elasticas (algo mayor en el grupo 2). Se observa un aumento tanto del grado de despegamiento como del desprendimiento endotelial en el grupo congelado con respecto al grupo control. Despues de la descongelacion, las maximas respuestas a los vasoconstrictores probados (KCl y noradrenalina) fueron del 13 y el 24% de las respuestas de las aortas que se obtuvieron en fresco. Las respuestas relajantes independientes del endotelio al nitroprusiato sodico estaban reducidas y se produjo una importante reduccion de las respuestas de relajacion dependientes del endotelio a la acetilcolina. Conclusiones El metodo de criopreservacion que se empleo disminuyo las respuestas de contraccion y relajacion a los seis meses y produjo cambios morfologicos importantes en cuanto a la conservacion del endotelio y de las elasticas, pero no altero el grado de apoptosis.